RESUMEN 


Los programas de genómica funcional en especies de interés agronómico o especies silvestres 
relacionadas no sólo conducirán a importantes avances del conocimiento, sino también a un 
salto cualitativo en el campo de la mejora. En particular, el empleo de herramientas 
genómicas ayudará a superar dos de los retos que todavía subsisten en el campo de la mejora 
molecular (i.e., vía transformación): la identificación de los genes que realmente controlan los 
caracteres de interés agronómico y la detección de señales de regulación que permitan 
modular la expresión de los transgenes a nivel espacial y temporal, evitando el coste 
energético que genera el empleo de promotores constitutivos (e.g., 35S), así como los efectos 
pleiotrópicos indeseables que usualmente ocasionan. Entre las vías para lograr tales objetivos, 
destaca la mutagénesis insercional por T-DNA, que en los últimos años se ha convertido en 
una herramienta básica para la identificación y etiquetado de genes, así como para el análisis 
de su función. En efecto, la disrupción de un gen endógeno o la integración del T-DNA en la 
vecindad del mismo pueden ocasionar la anulación o alteración de función, dando una valiosa 
información sobre el papel de un cierto gen en un carácter dado. Otra aplicación de la 
mutagénesis insercional por T-DNA estriba en la detección de elementos de regulación 
mediante el empleo de los denominados “sistemas trampa” (trapping) que permiten detectar 
secuencias reguladoras y asignar una función a partir de datos de expresión del delator que 
mimetiza la expresión del gen endógeno. El aspecto más relevante de estas aproximaciones es 
que, tras la identificación de un cierto gen, éste queda etiquetado por el T-DNA, lo que facilita 
su clonación. 

En nuestro laboratorio estamos abordando un proyecto en colaboración con los grupos de los 
Dres. Rafael Lozano y Trinidad Angosto (Universidad de Almería) y de la Dra. Mª Carmen 
Bolarín (CEBAS, CSIC, Murcia) en el que estamos utilizando dos herramientas genómicas 
(mutagénesis insercional y trapping) en tomate (cvs. P73 y Moneymaker) y una especie 
silvestre relacionada (Solanum pennellii) para identificar secuencias codificantes o elementos 
de regulación de genes implicados en procesos del desarrollo vegetativo (arquitectura de la 
planta) y reproductivo (flor y fruto), así como en dos tipos de estrés abiótico (salinidad y 
estrés hídrico). 

La aportación de esta Tesis Doctoral en este proyecto de investigación ha sido la generación 
una colección de líneas de inserción por T-DNA en tomate y la identificación de mutantes 
afectados en caracteres relacionados con el desarrollo. En concreto, se han generado más de 
1200 líneas T-DNA y se han obtenido sus descendencias TG2. La caracterización de estas 
líneas en TG1 ha conducido a la detección de 255 mutantes (de tipo dominante, 
semidominante o aditivo) afectados en caracteres vegetativos y/o reproductivos. Asimismo, se 
ha caracterizado una pequeña muestra de progenies TG2 (en concreto 37) lo que ha permitido 
la identificación de 6 mutantes recesivos. Además, el empleo de una trampa de 
intensificadores para generar las líneas de T-DNA ha permitido identificar un buen número de 
genotipos que pueden tener un notable interés por el patrón de expresión que exhiben.