L’objectiu general de la present tesi doctoral és el desenvolupament d´eines per a la producció i la aplicació de dos enzims glicosídics: alfa-L-arabinofuranosidasa, provinent del fong Aspergillus niger (Abf), i beta-D-glucosidasa (Bgl), provinent del llevat Candida molischiana. Aquestes hidrolases s’empren en l’alliberament de sucres en processos de conversió de biomasa i a la indústria alimentària, tanmateix com a la síntesi d’aminoglicòsids, glicoconjugats i oligosacàrids, compostos de gran valor afegit a la indústria químico-farmacèutica. Els gens que codifiquen aquests enzims s’han expressat al llevat metilotròfic Pichia pastoris, i els enzims produïts s’han purificat per a caracteritzar les seves propietats bioquímiques. S’ha comprovat també la seua capacitat per catalitzar reaccions de transglicosilació amb elevats rendiments. En relació a la seua producció, s’ha establert i validat un model basat en restriccions del metabolisme de P. pastoris, avaluant la seua consistència mitjançant anàlisis de fluxes metabòlics probabilístic. El model obtingut permet estimar la taxa de creixement i la distribució de fluxes intracel•lulars a partir de un reduït nombre de fluxes extracel•lulars mesurats experimentalment. Addicionalment, el model s’ha extès per a estimar la productivitat de proteïna recombinant, i s’ha utilitzat per a validar diverses condicions de cultiu de les soques transgèniques que sobreprodueixen els enzims Abf i Bgl. Finalment, els enzims recombinants obtinguts s’han immobilitzat en materials mesoporosos, organosíliques bimodals de la família UVM-7. Els biocatalitzadors resultants s’han caracteritzat bioquímica i físico-químicament, i s’han avaluat en diferents aplicacions d’interès biotecnològic.