RESUMEN
Los objetivos de este trabajo fueron: i) Evaluar los efectos del tamaño del embrión, el genotipo y el ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) sobre la regeneración de plantas a partir de embriones híbridos de maíz x T. dactyloides; ii) Determinar el nivel de tolerancia a la salinidad y alcalinidad de T. dactyloides en estadio vegetativo temprano y compararlo con el del maíz (línea B73, ampliamente difundida como progenitora de híbridos comerciales) en las mismas condiciones; iii) Evaluar el comportamiento de generaciones avanzadas (MT41 y MT51 ) de un híbrido F1 (2n = 56) de maíz x T. dactyloides altamente estéril que mostró tolerancia a la salinidad por NaCl. Para cumplir el primer objetivo, se polinizaron cuatro genotipos de maíz (2n = 20) con T. dactyloides (2n = 72). Los embriones se aislaron del cariopse a los 13, 14, 15, 16 ó 19 días después de la polinización y se colocaron sobre un medio básico sin reguladores de crecimiento ó con 4,6 ?mol L-1 de 2,4-D. Para cumplir el segundo objetivo, se cultivaron plantas de maíz y T. dactyloides en soluciones nutritivas que contenían 5 mM del tampón clorhidrato de Tris-ClH[hidroximetil]-aminometano y dos niveles de salinidad y dos pH diferentes: 1 mM NaCl-pH 5,8 (control); 1 mM NaCl-pH 8,5; 101 mM NaCl-pH 5,8; 101 mM NaCl-pH 8,5. Para cumplir el tercer objetivo, se cultivaron plantas de maíz (línea B73) y los híbridos MT41 y MT51 en soluciones nutritivas con pH 5,8 y dos niveles de salinidad: 1 y 101 mM de NaCl. Los tratamientos comenzaron a los 7 días (maíz e híbridos) y 14 días (T. dactyloides) después de la siembra (DDS) y las determinaciones se realizaron a los 22 y 38 DDS, respectivamente. Los embriones de 1,25 mm de longitud o menos originaron el 99,4 % de los callos con capacidad de regeneración. Tres de los híbridos originaron un número similar de plantas hasta los 6 meses después de la siembra de los embriones. El cuarto híbrido, obtenido del cruzamiento con la línea de maíz B73, dio lugar a callos caulogénicos, pero no se logró la elongación de los brotes y la regeneración de plantas enteras. Los embriones sembrados en el medio sin 2,4-D no originaron plantas viables. Las plantas regeneradas tenían un número cromosómico somático de 2n=46, características similares a las plantas de T. dactyloides y no produjeron semillas viables. T. dactyloides fue más sensible a la salinidad (101 mM-NaCl-pH 5,8) que el maíz (51 % vs. 28 % de reducción en el peso seco aéreo con relación al control, respectivamente). La alcalinidad (con 1 o 101 mM de NaCl) indujo reducciones similares del peso seco (PS) aéreo en maíz (45 % y 51 %, respectivamente) y T. dactyloides (51 % y 58 %, respectivamente). El PS de la raíz no se vio afectado por la salinidad ni por la alcalinidad. El contenido foliar de Na+ de T. dactyloides fue 3,7 veces menor que el del maíz. Esta diferencia puede explicarse por la menor absorción (acumulación de Na+ total en la planta/PS de la raíz) y translocación de Na+ hacia la parte aérea (acumulación total de Na+ en el tallo/Na+ en la raíz) de T. dactyloides, que en ambos casos son un 50 % menores. El único parámetro iónico afectado por la alcalinidad (pH = 8,5) fue el contenido de Na+ de la raíz de las plantas de T. dactyloides sometidas a estrés salino, las cuales mostraron un incremento del 24% con respecto a las cultivadas con pH 5,8. Las plantas de la segunda progenie del híbrido F1 (2n=56) de maíz x T. dactyloides mostraron números cromosómicos de 2n = 21 y 23 (20 de maíz y el resto de T. dactyloides) y la fertilidad del polen varió del 31% al 97%.  La fertilidad del polen también fue variable en la cuarta (36% al 99%) y quinta (0% al 99%) progenies del híbrido F1. La reducción del PS aéreo causada por la salinidad fue menor en el maíz (12 %) que en el híbrido MT41 (32 %), mientras que el híbrido MT51 (22 %) mostró valores intermedios. Solamente el porcentaje de pérdida de electrolitos foliares (PPEf) difirió entre los híbridos MT41 (16 %) y MT51 (14 %) y el maíz (12 %).  La salinidad redujo el contenido relativo de agua (CRA) y el contenido de clorofila total en el maíz, T. dactyloides y los híbridos MT41 y MT51, pero no afectó el PPEf ni la masa foliar específica (MFE), con respecto a las plantas control.  En condiciones de salinidad, el maíz y los híbridos MT41 y MT51 mostraron contenidos foliares de Na+ similares (0,74; 0,78 y 0,82 mmol g-1 de PS; respectivamente). El nivel de tolerancia de los híbridos MT41 y MT51 (generaciones avanzadas de un híbrido F1 de maíz x T. dactyloides tolerante a la salinidad) fue similar al del maíz y mayor al de T. dactyloides. La mayoría de los parámetros evaluados (CRA, MFE, PPEf, contenido de clorofila total) mostraron una respuesta a la salinidad similar en maíz y T. dactyloides. Más aún, T. dactyloides mostró una mayor eficiencia que el maíz en algunos algunos parámetros iónicos asociados con la tolerancia a la salinidad, tales como la capacidad de mantener una baja concentración foliar de Na+ y una menor absorción y translocación de Na+ hacia la parte aérea. Estas características no se observaron en los híbridos MT41 y MT51, los cuales mostraron valores similares al maíz en la mayoría de los parámetros evaluados, ya sea en presencia o no de salinidad. En este contexto, la mayor sensibilidad de T. dactyloides a la salinidad, en comparación con la del maíz, estaría relacionada, al menos en parte, con una diferente respuesta a nivel del tejido foliar, i.e. una menor capacidad de compartimentación del Na+ hacia la vacuola. Probablemente, los parámetros iónicos favorables de T. dactyloides, si bien no confieren por sí mismos tolerancia en la especie, combinados con mecanismos presentes en el maíz resultaron en una tolerancia a la salinidad mejorada en el híbrido F1 (Pesqueira et al., 2006), con respecto a las especies parentales. 
      
Palabras clave: maíz, T. dactyloides, híbridos interespecíficos, incompatibilidad post-cigótica, caulogénesis, salinidad, alcalinidad, contenido foliar de Na+, contenido relativo de agua, masa foliar específica, contenido de clorofila. 



	





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