Resumen El tratamiento de los espermatozoides de especies sensibles al choque térmico con ciclodextrinas saturadas de colesterol (CLC) previamente a la congelación mejora el porcentaje de espermatozoides que sobreviven tras la descongelación. Recientemente se demostró que este tratamiento mejoraba la calidad del semen de verracos (especie muy sensible a los choques térmicos y osmóticos) cuando se utilizaba a una concentración de 1 mg/120 x 106 espermatozoides. No obstante, se desconoce cómo afecta este tratamiento a la funcionalidad de los espermatozoides in vitro y a su fertilidad. El objetivo de esta Tesis ha sido determinar el efecto del tratamiento de los espermatozoides de verracos con CLC previamente a la congelación en distintos aspectos de funcionalidad in vitro (resistencia osmótica, movilidad e integridad de la membrana plasmática, estado y dinámica de capacitación, capacidad de adherencia a células epiteliales del oviducto y dinámica de la integridad de la cromatina) y en la fertilidad de los espermatozoides in vitro (capacidad de penetrar ovocitos inmaduros) e in vivo (en cerdas destetadas y tratadas hormonalmente con eCG-hCG e inseminadas cervicalmente a las 37 ó 30 h tras la inyección de hCG). El tratamiento de los espermatozoides de porcino con CLC amplió (P<0,05) los límites de resistencia osmótica de los espermatozoides refrigerados tanto en el lado hipo- (50, 75 y 150 mOsm/kg) como hiper-osmolar (600 y 800 mOsm/kg). Así, como mínimo el 45% de los espermatozoides tratados con CLC mantuvieron la integridad de su membrana (%LS) y entre el 40 y el 50% mantuvieron el porcentaje de espermatozoides móviles progresivos (%PMS) y móviles totales (%TMS) respectivamente. Tras la descongelación, los espermatozoides tratados con CLC mostraron valores similares al control en cuanto a calidad espermática (porcentaje de espermatozoides vivos con acrosoma intacto, %LIA; %TMS; %PMS), pero fueron capaces de mantener su calidad durante más tiempo (%LS, %TMS y %PMS, +1,5 h; P < 0,05) que las muestras control. Además, se observó que los espermatozoides conservados a 16 ºC mantienen una calidad aceptable durante al menos 6 h (43% TMS y 30% PMS) y tras 26 h las muestras mantienen 55% de LS y 28% de TMS. Esto podría resultar útil para el manejo de este tipo de semen en las granjas. Los espermatozoides tratados con CLC presentaron tras la descongelación un estado de capacitación y una dinámica de capacitación similares a las muestras control. Además, este tratamiento no afectó a la dinámica de la integridad de la cromatina. Sin embargo, los espermatozoides tratados con CLC presentaron mayor capacidad de adherencia (+5; P < 0,0001) a las células epiteliales del oviducto in vitro que las muestras control. Con respecto a la capacidad fecundante, los espermatozoides tratados con CLC penetraron más eficazmente los ovocitos inmaduros (+17%; P < 0,0001) y se observó mayor número de espermatozoides penetrados por ovocito (+2; P < 0,0001) in vitro que en las muestras control. No obstante, este tratamiento no mejoró la capacidad fecundante de los espermatozoides in vivo (ni a 37 ni a 30 h de asincronía), aunque cuando se redujo la asincronía entre la inducción de la ovulación y la inseminación (de 37 a 30 h), se observó una mejora en el porcentaje de fertilidad a parto que se igualó a los valores obtenidos con las muestras control (P > 0,05). Por otra parte, las muestras control presentaron una fertilidad similar en ambas asincronías. Aunque los datos obtenidos no resultan concluyentes, es posible que este tratamiento modifique la estructura y organización de la membrana plasmática y como consecuencia su funcionalidad. Desconocemos en qué consiste exactamente esta modificación, pero parece que influye en los procesos que intervienen en la fecundación, y estos espermatozoides tratados con CLC necesitan asincronías (entre ovulación e inseminación) diferentes a las utilizadas para las dosis de semen congelado-descongelado.