Resum
La producció ovina representa un rubro important dins del sistema agropecuari de l’Argentina i la brucelosi causada per Brucilla Ovis és considerada com el principal motiu dels problems reproductius en aquesta espècie. Si bé a la data no ha estat reportada com causa de malaltia a l’humà, hi ha treballs que informen sobre la presència d’anticossos en sang de personal exposat.
La malaltia es troba a totes les regions del pais on es crien ovelles, amb prevalències que varien de 3 a 50%. Fins ara, no existeix un programa nacional o provincial per al control, sent pocs els laboratoris de diagnòstic que ofereixen un servici amb tècniques d’alta sensibilitat i especificitat. El diagnòstic clínic de la infecció per B.bovis, mitjançant palpació dels epidídims i testicles, no és suficientment sensible i ha de considerar-se com a presuntiu. L’únic diagnòstic reialment creïble és l’aïllament i identificació del bacteri, però és un mètode poc pràctic per a realitzar-lo en gran nombre d’animals i un resultat negatiu no assegura que l’animal no estiga malalt. Per al diagnòstic de rutina l’ús de proves serològiques està molt difós, i les recomanades com més eficients són: immunodifussió en gel d’agar (IDGA), fixació del complement (FC) i IELISA.
El primer objectiu del present treball va ser identificar proves serològiques que, a més de ser sencillez i pràctiques, presenten alta sensibilitat i especificitat. B. ovis i B.canis comparteixen components antigènics, per la qual cosa ambdues podrien ser utilitzades com antigen amb resultats similars. No obstant això, l’ús de la soca de B. canis (M-) permet desenvolupar un antigen estable, útil per a una prova ràpida de microaglutinació. Es van estudiar proves de IDGA i IELISA, utilitzant antigen B. ovis al sèrum de 225 animals. En les mateixes mostres es realitzà una prova ràpida de microaglutinació (RSAT), 2-mercaptoetanol RSAT (2ME-RSAT) i IELISA utilitzant l’antigen B.canis. Els valors de tall de les IELISA foren ajustats per anàlisi de la corba ROC, utilitzant 51 sèrums negatius i 32 sèrums positius; el valor de tall del IELISA-B.canis va ser de 39% (%P) i el de IELISA-B.ovis 51% (%P), amb un 100% de sensibilitat i especificitat. Dels 32 sèrums positius de la pleta infectada RSAT va detectar 32 (100%); 2Me-RSAT 29 (91%) i IDGA 31 (97%). Dels 142 sèrums d’animals sospitosos 46 van ser negatius i 56 positius a totes les proves; 16 fóren positius amb RSAT, IELISA-B.canis i IELISA-B.ovis; 20
12
positius solament amb RSAT i 2 positius amb ambdues IELISA. RSAT per ser simple de realitzar i fàcil d’interpretar pot utilitzar-se com a prova tamís en reemplaçament deIDGA, per al diagnòstic de brucelosi ovina causada per B.ovis. Els IELISA-B.canis i IELISA-B.ovis poden ser utilitzats indistintament com a proves confirmatòries, ja que mostren igual sensibilitat i especificitat.
Un segon objectiu va ser investigar la presència d’anticossos en llet d’ovelles.
La llet és una mostra clínica poc estudiada per al diagnòstic de brucelosi causada per B.ovis i té l’avantatge de prendre’s en forma ràpida i no invasiva. En el present treball es van avaluar 144 ovelles en lactància, a les quals se’ls van prendre mostres de sang i llet simultàniament, efectuant-se estudis bacteriològics, serològics i recerca d’anticossos en llet utilitzant antígens B.canis i B.ovis. A la llet es van realitzar les proves de IELISA amb antigen B.canis i B.ovis i al sèrum: RSAT, IDGA i IELISA amb els mateixos antígens. Les 75 ovelles d’un establiment lliure de brucelosi, bacteriològicament negatives, presentaren serologia negativa a les proves de RSAT i IELISA-B.canis i a IDGA i IELISA-B.ovis. El valor de tall es va ajustar per anàlisi de la corba ROC utilitzant els valors dels IELISA-B.canis i B.ovis de les 75 ovelles negatives i 23 mostres de 5 ovelles infectades, sent %P 33 per a IELISA-B.canis i %P 26 per a IELISA-B.canis; resultant la prova en un 100% d’especificitat i sensibilitat. De les 64 mostres d’una pleta bacteriològicament negativa, però sospitosa de tenir la malaltia, 11 van resultar positives a les proves de IELISA-B.canis i IELISA-B.ovis en llet.
Basant-se en els resultats obtinguts es proposa per al diagnòstic de brucelosi d’ovelles en lactància, la prova d’IELISA en llet amb antigen B.canis o B.ovis.
13