RESUMEN


El virus de la tristeza de los cítricos (CTV) ha causado millonarias pérdidas a la citricultura a nivel mundial. En el caso de Chile, hasta el inicio del presente estudio la situación real era desconocida aunque se había reportado la presencia del virus a fines de la década de 1960 en limoneros Meyer que fueron erradicados. Considerando la importancia de CTV y la enfermedad que causa, el objetivo básico de esta tesis fue analizar la situación actual de CTV en Chile, realizar una amplia prospección, estimar su incidencia, estudiar su epidemiología y realizar una completa caracterización biológica, serológica y molecular de aislados chilenos de CTV representativos. La incidencia fue estimada con un muestreo del 1% de los árboles en las regiones citrícolas: I, III, IV, V, VI, VII y Metropolitana. CTV fue detectado mediante ELISA-DAS de 1999 a 2001 y mediante Inmunoimpresión-ELISA de 2001 a 2004, ambas técnicas con la combinación de anticuerpos monoclonales 3DF1 y 3CA5. Además, se anotaron síntomas y se muestrearon e identificaron colonias de pulgones presentes en los huertos. Se colectaron 100 aislados de CTV de diferentes hospedadores y zonas ecológicas, que fueron caracterizados. La caracterización biológica se llevó a cabo en lima mejicana, naranjos dulce y agrio, pomelo, y las combinaciones dulce/agrio y agrio/dulce. La caracterización serológica fue realizada mediante ELISA-DASI con 12 anticuerpos monoclonales diferentes. La caracterización molecular se efectuó mediante RT-PCR con 12 pares de iniciadores distintos. Adicionalmente, se realizó RT-PCR y PCR a tiempo real con iniciadores universales de CTV. Además, se realizó un estudio epidemiológico para evaluar la evolución espacio-temporal de CTV en seis parcelas experimentales y la realización de dos ensayos de transmisión con 10 aislados chilenos de CTV representativos. 

CTV se ha detectado en todas las zonas citrícolas de Chile, a excepción de la VII Región, con una incidencia media del 0,38%, y asociado a todas las especies de cítricos cultivadas. No se observaron síntomas de decaimiento sobre naranjo amargo. En el oasis de Pica (I Región), se observaron acanaladuras en la madera en árboles de pomelo y lima mejicana. Las especies de pulgones vectoras de CTV detectadas fueron: Aphis gossypii, A. spiraecola y Toxoptera aurantii. De acuerdo a los resultados obtenidos en la caracterización de aislados chilenos de CTV, se determina en la zona central de Chile la presencia mayoritaria de aislados atenuados (MCA13 negativos), mientras que en la I Región, se establece la presencia de aislados agresivos, algunos capaces de causar acanaladuras en pomelo y naranjo dulce, siendo todos  MCA13 positivos y con características moleculares asociadas al tipo VT. En el estudio espacio-temporal, fue posible demostrar un aumento en la incidencia de CTV en las parcelas experimentales a través del tiempo, salvo en un huerto de limonero. En ensayos de transmisión sólo un aislado fue transmitido con una eficiencia baja de transmisión. 

En función de los resultados obtenidos se dan una serie de recomendaciones para la citricultura chilena que incluyen el uso exclusivo de material vegetal certificado y la conveniencia de erradicar los focos con aislados agresivos.