RESUM


Les gibberel.lines (GA) són hormones vegetals que regulen diversos processos del desenvolupament i creixement de les plantes. Els nivells de les GA actives (GA1 i GA4) estan regulats per enzims de biosíntesi com els GA 20-oxidases (GA20ox) i GA 3-oxidases (GA3ox) i per enzims de catabolisme GA 2-oxidases (GA2ox). Per mitjà d'aproximació de genètica reversa s'ha estudiat el paper d'alguns gens del metabolisme de GA, en l'homeostasi dels continguts de GA i en el desenvolupament de tabac (Nicotiana tabacum var. xanthi). Plantes transgèniques que sobreexpressen un gen de GA3ox (35S:PsGA3ox1) van presentar xicotetes variacions en el fenotip així com lleus increments en el contingut de GA1, probablement pel fet que aquest enzim no és limitant. Addicionalment es va trobar un augment d'expressió de GA2ox, NtGA2ox3 i -5, els quals pareixen tindre un paper important en el control de l'homeostasi de GA quan succeïxen xicotets increments en el seu contingut endogen, per tant serien els responsables d'evitar l'acumulació de GA1 convertint-lo en GA8 en aquestes plantes. Paral•lelament, l'estudi de l'efecte de la sobreexpressió conjunta d'una GA3ox amb una GA20ox (35S:PsGA3ox1 x 35S:CcGA20ox1) on es van observar poques variacions en el fenotip així com en el contingut de GA actives (GA1 + GA4) en comparació amb el seu parental GA20ox. Aquests resultats, corroboren el caràcter no limitant de GA3ox en el metabolisme de GA en tabac. 

D'altra banda, s'ha estudiat el paper de la família de gens de GA 2-oxidases (gens del catabolisme de GA), per mitjà de la tècnica de silenciament gènic post-transcripcional de RNA d'interferència (RNAi). Els GA2ox de tabac estan codificats per almenys 5 gens amb alt grau de redundància en la seua expressió. Amb l'objectiu d'obtindre plantes transgèniques de tabac amb múltiple silenciament gènic es va elaborar una construcció tipus ganxo portadora d'una seqüència altament conservada en els 5 clons de GA2ox, capaç d'induir la supressió d?expression d'aquests gens al mateix temps per mitjà de RNAi. Les plantes transgèniques de silenciament GA2ox/RNAi van presentar en la seua majoria fenotips semblants als fenotips de superproducció de GA (increments en la longitud d’hipocotil, entrenucs, fulles, peduncle de fruits, així com de l'altura final de plantes). Addicionalment, en aquestes plantes es van detectar altres fenotips com la inhibició en la longitud de l'arrel, retard en la floració i baixa fertilitat que també pareixen estar associats a un excés de GA. Tots aquests resultats en les plantes de silenciament GA2ox/RNAi, suggerixen la importància dels gens GA2ox en el control dels nivells de GA que modulen diversos processos del desenvolupament de tabac. 

Finalment, s'ha estudiat el paper de les GA en la inducció de la floració en plantes de tabac. Es van quantificar els nivells de GA1 i GA4 en àpexs en diferents estadis del desenvolupament i es va trobar una reducció progressiva dels seus nivells a mesura que les plantes s'acostaven a la floració. Aquest resultat exclou a aquestes dos GA com a inductores de la floració en tabac. No obstant això, tant per deficiència o per excés de GA, la floració en tabac es retarda. Açò indica que és necessari que el nivell de GA estiga dins d'un interval òptim (damunt d'un mínim i per davall d'un màxim), perquè ocórrega la floració