An‡lisis funcional de los factores de transcripci—n TOWER OF PISA 1 y TOWER OF PISA 2 y su implicaci—n en el desarrollo del gineceo de Arabidopsis. Los carpelos, organizados en un gineceo, presentan el mayor grado de complejidad anat—mica y funcional de entre los —rganos florales. El fruto deriva fundamentalmente del gineceo y es un —rgano altamente especializado cuya funci—n, una vez se produce la polinizaci—n y fertilizaci—n, es asegurar la maduraci—n y la posterior dispersi—n de las semillas. A pesar del gran progreso que ha tenido lugar en los œltimos a–os, aœn quedan por resolver numerosos interrogantes acerca de la morfogŽnesis del gineceo y la fructificaci—n. Una manera obvia de contribuir al esclarecimiento de estas cuestiones es desvelar la participaci—n de nuevos moduladores genŽticos, cuyas alteraciones provoquen perturbaciones morfol—gicas visibles en el desarrollo del gineceo. En esta Tesis Doctoral se ha pretendido profundizar en la comprensi—n de las v’as genŽticas implicadas en el desarrollo del gineceo, as’ como de la coordinaci—n de dichas rutas. Para ello se ha realizado un esfuerzo para caracterizar funcionalmente dos miembros de una familia de factores transcripcionales con dominio B3, TOP1 y TOP2, que parec’an estar implicados en la diferenciaci—n del gineceo y ser un factor comœn a varias de las v’as ya descritas. Se ha intentado establecer cu‡les son las relaciones genŽticas y moleculares de estos genes con otros identificados previamente, y que actœan en distintos aspectos del desarrollo del gineceo y el fruto de Arabidopsis. Para ello, se han caracterizado funcionalmente dichos genes mediante la obtenci—n de l’neas de pŽrdida y de ganancia de funci—n de los mismos, y la caracterizaci—n fenot’pica de dichos mutantes. As’, se ha comprobado que est‡n implicados redundantemente en el desarrollo de las regiones apicales del gineceo, promoviendo la diferenciaci—n de las cŽlulas del estilo y el estigma. Se ha determinado que el patr—n de expresi—n espacio-temporal de TOP1 y TOP2 coincide con las regiones afectadas en los mutantes de pŽrdida de funci—n, es decir, el estilo y el estigma. TambiŽn se ha detectado expresi—n en otras regiones del gineceo y otros —rganos florales, as’ como en las hojas y ra’ces, en general coincidiendo con zonas de elongaci—n y/o aparici—n de nuevos —rganos, y con regiones que se han relacionado con elevadas concentraciones de auxinas. Por otra parte, se han analizado las interacciones genŽticas entre TOP1, TOP2 y otros genes ya caracterizados implicados en el desarrollo del gineceo, mediante la generaci—n de diversas combinaciones mutantes y la determinaci—n de los patrones de expresi—n de TOP1 en diferentes fondos mutantes. As’ mismo, se he determinado el efecto que las mutaciones top1 y top2 tienen sobre la expresi—n de los otros genes estudiados. As’, se ha comprobado que actœan junto a los genes STY y SPT en el desarrollo de las regiones apicales del gineceo, donde no se ha detectado una regulaci—n directa entre ellos. S’ que se ha observado que TOP podr’a reprimir a SPT en otras regiones, como los —vulos y las semillas. Asimismo, se ha observado que ETT reprime la expresi—n de TOP1 en regiones apicales del ovario. TambiŽn se han observado que los genes TOP actœan de forma sinŽrgica con LUG en el desarrollo de los tejidos marginales, como el estilo, el estigma y el septum. Por otra parte, se ha comprobado que los genes TOP podr’an estar relacionados con la s’ntesis de auxinas, y que est‡n implicados en el desarrollo del eje medio-lateral del gineceo de Arabidopsis activando directa o indirectamente a IND. Y por œltimo, mediante el escrutinio de una librer’a de doble h’brido, se ha determinado que los genes TOP interaccionan f’sicamente con YAB3 y BRX-L4, dos reguladores transcripcionales implicados en el establecimiento de la polaridad abaxial-adaxial del gineceo y en el crecimiento de la ra’z respectivamente. RESòMENES RESòMENES