El ácido abscísico (ABA) es una hormonal vegetal que tiene un papel crucial en las respuestas adaptativas de las plantas al estrés por sequía, salinidad o frío, además de regular importantes procesos del desarrollo de las plantas como el desarrollo del embrión, dormición, germinación, crecimiento vegetativo, organogénesis y floración. En el campo de la señalización por ABA existen múltiples evidencias de que las proteínas fosfatasas 2C (PP2Cs) son claves para comprender los procesos en los que media esta hormona. Entre estas PP2Cs se encuentran las fosfatasas de la especie modelo Arabidopsis thaliana ABI1 y ABI2 (ABA-INSENSITIVE) que actúan como reguladores negativos de la ruta de transducción de señal de ABA. Nuestro trabajo se centra en la PP2C HAB1 (HYPERSENSITIVE TO ABA) cuyo secuencia genómica fue clonada por homología con ABI1 y ABI2. Para el estudio y caracterización de esta nueva PP2C, comprobamos que HAB1 se expresa de forma ubicua en sitios importantes de la acción del ABA como células oclusivas o semillas y que su expresión es inducible por ABA. Realizamos un abordaje de genética reversa, novedoso en el campo de la señalización por ABA, con el aislamiento y caracterización de un alelo de pérdida de función hab1-1 y, con la generación y el estudio de líneas que sobre expresan HAB1. La hipersensibilidad del mutante hab1-1 y la insensibilidad de las plantas 35S:HAB1 proporcionan una nueva evidencia genética del papel de la PP2C HAB1 como regulador negativo de la señalización por ABA. Con la intención de conocer y profundizar más en los detalles moleculares de la función de HAB1 en la ruta de señalización por ABA, realizamos una búsqueda por doble híbrido de las posibles dianas de interacción de HAB1 en una librería de cDNA de Arabidopsis. HAB1 interacciona con la proteína SWI3B, un homólogo de la subunidad SWI3B del complejo remodelador de cromatina SWI/SNF de levaduras. La interacción mapea en la mitad del dominio N-terminal de AtSWI3B, es específica para HAB1 y requiere un dominio catalítico intacto de la fosfatasa. Confirmamos la interacción de HAB1 y SWI3B en núcleo mediante ensayos de interacción proteína-proteína por complementación bimolecular de la fluorescencia (BiFC) en Nicotiana benthamiana y, en ensayos de coinmunoprecipitación. Mutantes swi3b muestran una reducida sensibilidad a ABA en ensayos de inhibición de germinación y crecimiento, asi como una reducida expresión de los genes de respuesta a ABA RAB18 y RD29B. Experimentos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) demuestran que la presencia de HAB1 en los promotores de los genes marcadores RAB18 y RD29B es suprimida por la presencia de ABA, lo que involucra directamente a HAB1 en la regulación de la transcripción en respuesta a ABA. Adicionalmente, estos resultados muestran el papel de SWI3B como un nuevo regulador positivo de la señalización por ABA, modulando HAB1 la respuesta a ABA a través de un supuesto complejo remodelador de cromatina del tipo SWI/SNF. Debido a que la familia de las PP2Cs del grupo A, HAB1, ABI1, ABI2 y PP2CA actúan como reguladores negativos claves en la ruta de señalización por ABA, aislamos y caracterizamos mutantes sencillos para generar posteriormente diferentes combinaciones de mutantes dobles y triples de pérdida de función en esas PP2Cs. Estudios previos a esta tesis no habían analizado mutantes de pérdida de función sencillos, dobles y triples en PP2Cs de plantas. El objetivo es determinar su contribución a la ruta de señalización por ABA y desentrañar posibles interacciones génicas y una posible redundancia funcional entre ellas. La comparación de las respuestas a ABA en diferente mutantes en pp2cs muestra un incremento progresivo de la sensibilidad a ABA obtenido a través de la inactivación combinada de esas PP2Cs. Estos resultados indican que la respuesta a ABA está regulada sutilmente por la acción integrada de estos genes, la cuál se requiere para prevenir una respuesta constitutiva al ABA endógeno que podría tener efectos deletéreos en el crecimiento y desarrollo en ausencia de estrés ambiental. El ácido abscísico tiene un papel esencial en la respuesta a la sequía. A pesar de los numerosos mutantes hipersensibles a ABA descritos, pocos de ellos muestran tolerancia a sequía. En esta tesis hemos generado mutantes hipersensibles a ABA tolerantes a la sequía por inactivación combinada de las PP2Cs HAB1 y ABI1. Los dobles mutantes hab1-1abi1-2 y hab1-1abi1-3 presentan un reforzamiento de la respuesta a ABA tanto en semilla como en tejido vegetativo, son especialmente sensibles a la inhibición de la germinación de la semilla mediada por ABA y, muestran hipersensibilidad en ensayos de crecimiento, cierre estomatal e inducción de genes de respuesta a ABA en comparación con los mutantes sencillos. En experimentos de pérdida de agua por transpiración en condiciones de sequía hab1-1abi1-2 y hab1-1abi1-3 muestran una reducción notable en la pérdida de agua respecto a los mutantes parentales sencillos. Estos resultados muestran que la inactivación combinada de PP2Cs específicas involucradas en la señalización por ABA puede ser una herramienta biotecnológica en la mejora de cultivos tolerantes a la sequía.