Evaluación in vitro de nuevos agentes fotosensibilizantes con aplicación en terapia fotodinámica para el tratamiento del melanoma humano

Abstract

[ES] El melanoma, originado en los melanocitos, es un tipo de cáncer de piel invasivo, con alta tendencia a metastatizar y que presenta una elevada resistencia a fármacos. En la actualidad, los tratamientos convencionales para melanoma son cirugía, radioterapia, quimioterapia, inmunoterapia o una combinación de estos. Sin embargo, tienen limitaciones y efectos adversos para el paciente por lo que en los últimos años se investigan tratamientos alternativos como la terapia fotodinámica (TFD). Esta terapia está basada en la administración de un compuesto fotosensibilizante (FS) sensible a la radiación lumínica a una longitud de onda determinada que hace que se excite y trans era su energía al oxígeno molecular de su entorno, generando especies reactivas de oxígeno, como el oxígeno singlete. Estas especies reactivas originadas producen daño de forma localizada que provoca la muerte de las células tumorales, evitando los efectos secundarios de tratamientos convencionales. En este trabajo se presenta la evaluación in vitro de nuevos compuestos químicos con potencial aplicación en TFD. Se evalúa su toxicidad en una línea tumoral de melanoma tras la irradiación del cultivo a una longitud de onda adecuada. Además, se evalúan los mecanismos de acción de la TFD mediante medidas de generación de oxígeno singlete por ensayos espectrofotométricos, así como la caracterización de la colocalización subcelular mediante microscopía de fluorescencia.

[CA] El melanoma, originat en els melanòcits, és un tipus de càncer de pell invasiu, amb alta tendència a metastatitzar i que presenta una elevada resistència a fàrmacs. En l'actualitat, els tractaments convencionals per al melanoma són cirurgia, radioteràpia, quimioteràpia, immunoteràpia o una combinació d'aquests. No obstant això, tenen limitacions i efectes adversos per al pacient per la qual cosa en els últims anys s'investiguen tractaments alternatius com la teràpia fotodinàmica (TFD). Aquesta teràpia està basada en l'administració d'un compost fotosensibilitzant (FS) sensible a la radiació lumínica a una longitud d'ona determinada que fa que s'excite i transferisca la seua energia a l'oxigen molecular del seu entorn, de manera que es generen espècies reactives d'oxigen, com l'oxigen singlet. Aquestes espècies reactives originades produeixen dany de forma localitzada que provoca la mort de les cèl·lules tumorals i evita els efectes secundaris de tractaments convencionals. En aquest treball es presenta l'avaluació in vitro de dos nous compostos químics amb potencial aplicació en TFD. S'avalua la seua toxicitat en una línia tumoral de melanoma després de la irradiació del cultiu a una longitud d'ona adequada. A més, s'avaluen els mecanismes d'acció de la TFD mitjançant mesures de generació d'oxigen singlet per assajos espectrofotomètrics, així com la caracterització de la colocalització subcel·lular mitjançant microscòpia de fluorescència.

[EN] Melanoma, caused by melanocytes, is an invasive type of skin cancer, highly resistant to drugs and has got a high tendency to metastasize. Currently, conventional treatments for melanoma are surgery, radiation therapy, chemotherapy, immunotherapy, or a combination of these. However, they have limitations and adverse e ects for the patient, for this reason alternative treatments such as photodynamic therapy (PDT) have been investigated in recent years. This therapy is based on the administration of a photosensitizing compound (FS) sensitive to light radiation at a certain wavelength that causes it to be excited and transfer its energy to the molecular oxygen in its environment, generating reactive oxygen species, such as oxygen singlet. These originated reactive species produce localized damage that causes the death of tumor cells, avoiding the side e ects of conventional treatments. In this work, the in vitro evaluation of two new chemical compounds with potential application in PDT is presented. Their toxicity in a melanoma tumor cell line is evaluated after irradiation of the cell culture at an appropriate wavelength. Furthermore, the mechanisms of action of PDT are evaluated by singlet oxygen generation measurements by spectrophotometric tests, as well as the characterization of subcellular colocalization by fluorescence microscopy.