Evaluación de la adaptación de cepas de Lactobacillus plantarum, potencialmente probióticas, a la presencia de sales biliares intestinales mediante el estudio comparativo de su proteoma

Abstract

[EN] The lactic acid bacteria are commonly used as probiotics due to their known beneficial effects on health. These effects are specific to each strain so it is necessary to unravel the probiotic characteristics of each one in order to select those that may have greater success in clinical trials. Tolerance to bile salts is one of the crucial properties to determine the survival of the bacteria in the gastrointestinal tract and consequently its ability to function as a probiotic. The aim of this work is the study of natural protein diversity of three commercial strains of Lactobacillus plantarum (299v, CECT 7316 and CECT 7315) in relation to their tolerance to bile salts, using a comparative proteomic study. In the present study, strains of L. plantarum are grown in medium Mann-Rogosa-Sharpe (MRS) added with bile salts or bovine or human origin in a concentration of 0.4% (w /v). The resistance of the strains studied were assessed by monitoring the growth kinetics of them in the different media used and by a comparative proteomic study to identify adaptive changes in strains of L. plantarum. The peptide fingerprint of the protein isolates obtained from bacterial extracts was determined by mass spectrometric techniques and query of international databases (NCBI and Mascott). The comparative proteome analysis of various strains of L. plantarum will allow to identify differential properties of these strains in their tolerance to bile salts and may serve as biomarkers for primary screening of potential probiotic strains.

[ES] Las bacterias acido-lácticas son comúnmente usadas como probióticos debido a sus conocidos efectos beneficiosos en la salud. Dichos efectos son específicos de cada cepa por lo que es necesario desentrañar las características probióticas de cada una para poder seleccionar aquellas que puedan tener mayor éxito en pruebas clínicas. La tolerancia a las sales biliares es una de las propiedades cruciales más importantes para determinar la supervivencia de las bacterias en el tracto gastrointestinal y consecuentemente su capacidad funcional como probiótico. El objetivo del presente trabajo es el estudio de la diversidad proteica natural de tres cepas comerciales de Lactobacillus plantarum (299v, CECT 7316 y CECT 7315) con relación a su tolerancia a las sales biliares, mediante un estudio proteómico comparativo. En el presente estudio, las cepas de L. plantarum se crecerán en medio Mann-Rogosa-Sharpe (MRS) adicionado o no con sales biliares de origen bovino o humano en concentración de 0.4% (p/v). La resistencia de las cepas estudiadas se valorará monitorizando la cinética de crecimiento de las mismas en los distintos medios utilizados y mediante un estudio proteómico comparativo para identificar los cambios adaptativos en las cepas de L. plantarum. La huella peptídica de los aislados proteicos obtenidos de los extractos bacterianos se determinará con técnicas de espectrometría de masas e interrogación de las bases de datos internacionales (NCBI y Mascott). El análisis comparativo del proteoma de las distintas cepas de L. plantarum permitirá identificar las propiedades diferenciales de estas cepas en su tolerancia a las sales biliares y podrían servir como biomarcadores para la selección primaria de potenciales cepas probióticas.