Análisis fenotípico de levaduras industriales y naturales respecto a su termotolerancia

Abstract

[ES] El diferente grado de termotolerancia ha sido determinado mediante crecimiento en sistemas miniaturizados (placas microtiter) y test de gotas a temperaturas que abarquen todo el rango biológico de crecimiento para diferentes especies de Saccharomyces (desde 4 hasta 42 ºC).Todas las cepas fueron clasificadas de acuerdo a su capacidad de crecimiento a las diferentes temperaturas. Una vez clasificadas las cepas, se llevó a cabo una selección con fenotipos muy divergentes. Es decir, se seleccionaron cepas que mostraban buen y mal crecimiento tanto a altas (>40 ºC) como a bajas (<15 ºC) temperaturas. Para validar las diferencias de capacidad de crecimiento a temperaturas extremas de las cepas seleccionadas, se llevó a cabo experimentos de competencia entre las cepas seleccionadas durante fermentaciones en diferentes medios. Para poder monitorizar la capacidad competitiva de cada cepa durante las fermentaciones, estas cepas fueron marcadas con resistencia al antibiótico geneticina. De manera que durante el experimento de competencia, el crecimiento será monitorizado por siembra en placa de medio YPD y, a la vez, en medio YPD + geneticina. Las diferencias de recuento entre ambas placas marcarán el grado de imposición de una cepa respecto a la otra.

[EN] The different degree of thermotolerance has been determined by growth in miniaturized systems (microplates) and spot test at different temperatures covering all biological growth range for different species of Saccharomyces (from 4 to 42 ° C). All strains will be classified according to their ability to grow at different temperatures. Once classified strains, was performed a selection with widely divergent phenotypes. That is, strains showing good and poor growth both at high (> 40 ° C) and low (<15 ° C) temperatures were selected. To validate the differences in growth capacity at extreme temperatures of the selected strains, was performed competition experiments between selected strains during fermentation in different media. In order to monitor the competitive capacity of each strain during fermentation, these strains were marked with geneticin antibiotic resistance. So during the competition experiment, growth will be monitored by plating on YPD and YPD + geneticin. Counting the difference between the two plates will mark the degree of imposition.