Efecto de la E-cadherina y la vía de Wnt en la mejora de la derivación de células madre a partir de blastómeros aislados

Abstract

[ES] La eficiencia de derivación de células madre embrionarias de ratón a partir de blastómeros aislados es todavía relativamente baja. En estudios previos realizados en nuestro laboratorio se observó que la eficiencia aumenta significativamente cuando se añade E-cadherina al proceso de derivación durante 24 h. Ésta actúa en las uniones adherentes y la incorporación exógena sirve para recrear la presencia de blastómeros vecinos. El objetivo de éste estudio es determinar el mecanismo por el cual se consigue dicho incremento. En concreto se pretende evaluar si la acción de la Ecadherina se lleva a cabo mediante la inhibición de la vía de Wnt, al reclutar ¿- cateninas en la membrana celular e impedir así su translocación al núcleo, donde actúa como efectora de la vía de Wnt activando una serie de genes. Para ello se utilizó un inhibidor de la vía canónica de Wnt, el IWR-1-endo, que actúa aumentando los niveles de axina, componente del complejo destructor de las ¿-cateninas. Nuestros resultados indican que la mejora de la eficiencia con el uso de Ecadherina no parece realizarse a través de la vía de Wnt.

[EN] Mouse embryonic stem cell derivation from isolated blastomeres still has a relatively low efficiency. Previous studies carried out in our laboratory showed that this efficiency increases when E-cadherin is added for 24 h during the derivation process. This protein acts at the cell adhesion level, recreating the presence of missing neighboring blastomeres. The aim of this study is to determine the mechanism which induces this increase in the derivation efficiency. Specifically, it intends to evaluate whether the E-cadherin action is exerted through an inhibition of the Wnt canonical pathway by recruiting ¿-catenins at the membrane level. This would impair their translocation to the cell nucleus, where ¿-catenins acts as effectors of the Wnt pathway by activating different groups of genes. To this aim, we used an inhibitor of the canonical Wnt pathway, IWR-1 endo, which acts by increasing axin levels, a protein that is part of the ¿-catenin destruction complex. Our results indicate that the increase in the derivation efficiency obtained after using E-cadherin does not seem to be exerted through the Wnt canonical pathway.¿