Abstract:
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La producción de doble haploides a través del cultivo de microsporas aisladas es una
alternativa para obtener líneas puras mucho más eficaz que las técnicas de mejora genética
clásica. Esta técnica presenta las ventajas ...[+]
La producción de doble haploides a través del cultivo de microsporas aisladas es una
alternativa para obtener líneas puras mucho más eficaz que las técnicas de mejora genética
clásica. Esta técnica presenta las ventajas de reducir considerablemente el tiempo y los
recursos, materiales y humanos, necesarios para la obtención de líneas puras. En berenjena
(Solanum melongena) esta técnica no está todavía puesta a punto.
En este trabajo hemos conseguido optimizar esta técnica en berenjena, regenerando
doble haploides de forma eficiente. Hemos demostrado también que tras la inducción, las
microsporas forman embriones y que es en etapas más tardías de la embriogénesis cuando
tiene lugar una desdiferenciación a callo. Los doble haploides regenerados fueron analizados
mediante técnicas de citometría de flujo y marcadores moleculares, demostrando su origen
androgénico.
Ésta técnica ha sido aplicada a distintos genotipos de berenjena para seleccionar el
que mejor responde a la inducción de androgénesis y a la regeneración. A partir del genotipo
seleccionado, hemos ensayado una serie de factores que en otras especies tienen un efecto
positivo en la inducción de androgénesis como son: butionin sulfoximina, ácido abcísico,
epibrasinólido, fuentes de carbono alternativas a la sacarosa, osmóticos, cocultivo con
microsporas de Brassica napus y goma arábiga. Con la mayoría de los factores se observaron
efectos positivos a nivel de la respuesta androgénica, crecimiento o mejora en la calidad del
material obtenido, llegando a obtener embriones en estadios más avanzados del desarrollo. Se
ensayaron también métodos de disgregación mecánica del material obtenido, para la
realización posterior de estudios de regeneración a planta completa de forma independiente
del genotipo.
Además de lo dicho, los resultados obtenidos abren nuevos caminos para continuar
mejorando la eficiencia de los cultivos de microsporas de berenjena, y conseguir la obtención
de doble haploides de forma rutinaria para su uso en programas de mejora.
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