Efecto del inhibidor de bromodominio JQ-1 en la expresión de IDH2

Abstract

[ES] El neuroblastoma es una neoplasia maligna que deriva de un desarrollo anómalo del sistema nervioso simpático. Se considera el tumor sólido extracraneal mas frecuente en infantes, representando entre 6%-10% de todos los cánceres infantiles. El neuroblastoma es una enfermedad compleja y heterogénea influida por factores como la edad en el momento del diagnóstico y características genéticas, moleculares y celulares. Esta heterogeneidad se refleja en la supervivencia de los pacientes con neuroblastoma, siendo inferior al 50% en pacientes de alto riesgo y en torno a un 90% en aquellos diagnosticados de bajo riesgo. El origen del neuroblastoma puede ser familiar o esporádico, siendo este último el más frecuente. En esta enfermedad juega un papel importante las alteraciones genéticas (amplificaciones, deleciones, pérdida de heterocigosidad¿) y epigenéticas. En este contexto cabe destacar genes como MYCN. MYCN es un gen que codifica para el factor de transcripción MYCN, el cual está implicado en la regulación de funciones biológicas como la vigilancia inmune, la proliferación celular, la supervivencia y la diferenciación. MYCN aumenta durante el desarrollo simpaticoadrenal y posteriormente disminuye de forma significativa durante el proceso de diferenciación. De modo que la amplificación de este gen en neuronas simpáticas maduras induce la progresión del ciclo celular y bloquea la apoptosis aumentando el riesgo de desarrollar neuroblastoma. Por ello, actualmente MYCN es considerado el mejor factor pronóstico de la enfermedad. Por otro lado, estudios previos habían demostrado asociación entre MYCN y el promotor del IDH2. La expresión elevada de IDH2 trae como consecuencia un aumento en la producción del oncometabolito 2-HG, aumentando los procesos de metilación de histonas y DNA y con ello favoreciendo la progresión tumoral. De este modo se quiso comprobar si al tratar dos líneas celulares de neuroblastoma con y sin MYCN amplificado con un inhibidor transcripcional de MYCN (JQ-1) se reducían tanto los niveles de MYCN como los de IDH2 favoreciendo el proceso apoptótico de las células tumorales. Sin embargo, nuestros resultados no demuestran correlación entre ambos genes ya que los niveles de IDH2 permanecen constantes, aunque disminuyan los niveles de MYCN. Este hecho nos llevó a plantear que la transcripción de IDH2 se estaba manteniendo por otros factores de transcripción a nivel de super-potenciadores o que el aumento de los niveles de metilación en neuroblastoma podría estar impidiendo la unión de CTCF a sus sitios objetivo, favoreciendo la transcripción de IDH2 de forma aberrante.

[EN] Neuroblastoma is a malignant neoplasm that results from an abnormal development of the sympathetic nervous system. It is considered the most common extracranial solid tumor in infants, representing between 6%-10% of all childhood cancers. Neuroblastoma is a complex and heterogeneous disease influenced by factors such as age at diagnosis and genetic, molecular and cellular characteristics. This heterogeneity is reflected in the survival of patients with neuroblastoma, being less than 50% in high-risk patients and around 90% in those diagnosed as low-risk. The origin of neuroblastoma may be familial or sporadic, the latter being the most frequent. Genetic alterations (amplifications, deletions, loss of¿heterozygosity) and epigenetics play an important role in this disease. In this context, genes such as MYCN should be highlighted. MYCN is a gene that codes for the MYCN transcription factor, which is involved in the regulation of biological functions such as immune surveillance, cell proliferation, survival and differentiation. MYCN increases during sympatho-adrenal development and subsequently decreases significantly during the differentiation process. So the amplification of this gene in mature sympathetic neurons induces cell cycle progression and blocks apoptosis by increasing the risk of developing neuroblastoma. Therefore, MYCN is currently considered the best predictor of the disease. On the other hand, previous studies had shown association between MYCN and the IDH2 promoter. The high expression of IDH2 results in an increase in the production of the 2-HG oncometabolite, increasing the processes of methylation of histones and DNA and thus favouring tumor progression. The aim was to check whether the treatment of two neuroblastoma cell lines with and without amplified MYCN with a transcriptional MYCN inhibitor (JQ-1) reduced both MYCN and IDH2 levels, favouring the apoptotic process of tumor cells. However, our results do not show correlation between the two genes as IDH2 levels remain constant, even if MYCN levels decrease. This fact led us to argue that the transcription of IDH2 was being maintained by other transcription factors at the level of super-enhancers or that increased methylation levels in neuroblastoma could be preventing the binding of CTCF to its target sites, favouring aberrant transcription of IDH2.