Aislamiento y caracterización de microvesículas procedentes de Glioblastoma Multiforme y su futuro empleo como marcadores diagnóstico

Abstract

Los gliomas malignos son los tumores cerebrales primarios más comunes, constituyendo además el tipo de tumor mayoritario en cerebro. Un tercio de estos tumores corresponde con Glioblastoma Multiforme (GBM), con una supervivencia media no superior a los 15 meses. En las células tumorales se ha observado un incremento en la formación y secreción de microvesículas exocíticas comparadas con células no tumorales. Estas microvesículas sintetizadas por las células del tumor están enriquecidas en proteínas, mRNA, miRNA, DNA y son capaces de atravesar la barrera hematoencefálica hacia el torrente sanguíneo. Trabajos recientes han relacionado las microvesículas procedentes de gliomas malignos con la trasferencia horizontal de proteínas y RNA a otros tipos celulares como las células endoteliales. En el presente trabajo se han asilado y caracterizado líneas enriquecidas con células iniciadoras de glioma a partir de muestras quirúrgicas. Estas células serán utilizadas como modelo in vitro para la optimización del protocolo de aislamiento y caracterización de microvesículas (MVs) así como para la caracterización del contenido de las mismas. Posteriormente, se empleará un modelo in vivo de ratón para distinguir entre DNA genómico humano y de ratón y con ello validar los biomarcadores candidatos. Por último, se validaran los genes candidatos utilizando muestras quirúrgicas de gliomas humanos y sangre periférica de pacientes tomada a lo largo del curso de la enfermedad. Por ello, el objetivo principal del presente trabajo es evaluar, aislar y caracterizar las MVs procedentes de los tres modelos y validar la utilización de secuencias de DNAs genómicos aisladas de los diferentes tipos de microvesículas como biomarcadores de tumores gliales malignos, con objeto de mejorar el diagnostico y pronóstico y de controlar la respuesta a los tratamientos convencionales y a los fármacos de nueva generación, de una forma no invasiva.