Identificación de genes relacionados con la respuesta necrótica en tomate (Solanum lycopersicum L.)

Abstract

[ES] En nuestro grupo se han obtenido una gran cantidad de líneas T-DNA de tomate y especies silvestres relacionadas en el contexto de varios proyectos en colaboración con el grupo del Dr. Rafael Lozano de la Universidad de Almería y la Dra. Mari Carmen Bolarín del CEBAS de Murcia. Se ha realizado el escrutinio de estas colecciones de líneas T-DNA para identificar mutantes alterados, entre otros, en caracteres del desarrollo vegetativo. Para ello, se han cultivado en el invernadero tanto las plantas transgénicas (se podrían identificar alteraciones de carácter dominante) como un número suficiente de plantas TG2 (obtenidas tras la autofecundación de las plantas transgénicas y en las que se podrían detectar mutaciones recesivas). Además de otras muchas alteraciones, se han identificado diferentes líneas que presentan respuestas necróticas alteradas a lo largo de su ciclo vital. Los mecanismos subyacentes a este carácter pueden tener gran interés en aspectos como tolerancia a estreses, tanto del tipo biótico (resistencia a patógenos) como abiótico y en la modificación del patrón de desarrollo. La ventaja principal del empleo de este tipo de material, cuando se pretende llegar a conocer cuál es el gen responsable del fenotipo mutante, es que el gen endógeno queda etiquetado por el T-DNA y se puede llegar a la clonación del gen mediante métodos basados en la PCR y que son mucho menos costosos en tiempo y recursos que otras técnicas como el mapeo por secuenciación. En este contexto, en el presente trabajo se pretende caracterizar fenotípicamente con mayor profundidad algunos de los mutantes con alteraciones en la respuesta necrótica previamente identificados en nuestro grupo. Además, se va a iniciar el análisis funcional de alguno de los genes identificados previamente en estos mutantes.

[EN] A large number of T-DNA lines of tomato and related wild species have been obtained in our group in the context of several projects in collaboration with the group of Dr. Rafael Lozano from the University of Almeria and Dr. Mari Carmen Bolarín from CEBAS in Murcia. These collections of T-DNA lines have been screened to identify mutants altered, among others, in vegetative development traits. For this purpose, both transgenic plants (dominant trait alterations could be identified) and a sufficient number of TG2 plants (obtained after self-fertilisation of the transgenic plants and in which recessive mutations could be detected) have been grown in the greenhouse. In addition to many other alterations, different lines have been identified that show altered necrotic responses throughout their life cycle. The mechanisms underlying this trait may be of great interest in aspects such as tolerance to stresses, both biotic (resistance to pathogens) and abiotic, and in the modification of the development pattern. The main advantage of using this type of material, when trying to find out which gene is responsible for the mutant phenotype, is that the endogenous gene is labelled by the T-DNA and the gene can be cloned using PCR-based methods, which are much less costly in terms of time and resources than other techniques such as mapping by sequencing. In this context, the present work aims to further phenotypically characterise some of the mutants with alterations in the necrotic response previously identified in our group. In addition, the functional analysis of some of the genes previously identified in these mutants will be initiated.