Estudio del efecto del boro y su transportador en células de cáncer de colon

Abstract

[ES] El cáncer de colon es la neoplasia maligna más frecuente que se puede presentar en el tubo digestivo y, a pesar de la incesante investigación, una de las patologías con mayor prevalencia en la población mundial. El riesgo de desarrollarlo está influenciado por una serie de factores que incluyen edad y dieta, pero principalmente es una enfermedad genética que resulta de la sobreexpresión de oncogenes e inactivación de genes supresores de tumores. La reincidencia tumoral y metástasis, así como la falta de agentes altamente efectivos, destacan la necesidad de nuevas terapias con enfoques específicos para combatir la enfermedad. La terapia dirigida como modalidad de tratamiento está cada vez más presente en la prevención y tratamiento de la carcinogénesis, por lo que comprender los procesos celulares que originan el desarrollo del cáncer y los mecanismos implicados en su propagación, pueden permitir el estudio de nuevas opciones terapéuticas. En el presente Trabajo de Fin de Grado, se ha evaluado el papel del boro y de su transportador (NaBC1) en dos líneas celulares de adenocarcinoma colorrectal SW480 (adherente y metastásica). Utilizando diversas concentraciones de boro diluido en el medio de cultivo, se han realizado estudios de viabilidad celular a diferentes tiempos para la evaluación de los posibles efectos citotóxicos del boro en estas líneas celulares cancerígenas. Posteriormente se han empleado unas plataformas biomateriales 2D capaces de presentar en la fase sólida el boro anclado covalentemente. De esta manera se ha estudiado el papel del transportador de boro en el comportamiento de las células de cáncer de colon, y su implicación en los fenómenos de la transición epitelio-mesenquimal (EMT) así como su relación con otras proteínas de membrana como las integrinas de unión a fibronectina y receptores de factores de crecimiento (GFR) tras su activación permanente. Para ello, se han realizado ensayos de inmunofluorescencia de marcadores típicos de la EMT, de integrinas y del NaBC1 para evaluar su expresión en ausencia/presencia de boro, así como su colocalización con integrinas y GFR. Estos estudios permitirán aportar conocimientos para descifrar el papel del transportador del boro en este tipo de neoplasias. Los resultados obtenidos permitirán plantear nuevas dianas terapéuticas para este tipo de cáncer epitelial.

[CAT] El càncer de colon és la neoplàsia maligna més frequent que es pot presentar en el tub digestiu i és, a pesar de les incessants investigacions, una de les patologies amb major prevalença en la pobalcó mundial. El risc de desarrollar-lo está influit per una sèrie de factors que inclouen la edat i dieta, però principalment és una malaltia genètica que resulta de la sobreexpressió d'oncogens e inactivació de gens supressors de tumors. La reincidència tumoral i metàstasis, així com la falta d'agents altament efectius, destaquen la necesitat de noves teràpies amb enfocaments específics per combatre l'enfermetat. La terapia dirigida com a modalitat de tractament està cada vegada més present en la prevenció i tractament de la carcinogènesi, per lo que comprendre els processos cel·lulars que originen el desenvolupament del càncer i els mecanismes implicats en la seua propagació poden permetre l'estudi de noves opcions terapèutiques. En el present Treball de Fi de Grau s'ha evaluat el paper del bor i del seu transportador (NaBC1) en dues línies cel·lulars d'adenocarcinoma colorrectal SW480 (adherent i metastàsica). Emprant diverses concentrscions de bor diluït en el medi de cultiu, s'han realitzat estudis de viabilitat cel·lular a temps diferents per a la evaluació dels possibles efectes citotòxics del bor en aquestes línies cel·lulars cancerígenes. Posteriorment s'han emprat unes plataformes biomaterials 2D capaces de presentar en la fase sòlida bor anclat covalentment. D'aquesta menera s'ha estudiat el paper del transportador de bor en el comportament de les cèl·lules de càncer de colon i la seua implicació en els fenomens de la transició epitelio-mesenquimal (EMT), així com la seua relació amb altres proteïnes de membrana com les integrines d'unió a fibronectina i els receptors de factors de creiximent (GFR) després de la seua activació permanent. Per fer-ho, s'han relitzat assajos d'inmunifluorescència de marcadors típics de la EMT, d'integrines i del NaBC1 per a evaluar la seua expressió en ausència/presència de bor, així com la seua colocalització amb integrines i GFR. Aquestos estudis permetran aportar coneiximents per desxifrar el paper del trasportador del bor en aquest tipus de neoplàsies. Els resultats obtinguts permitran plantejar noves dianes terapèustiques per aquest tipus de càncer epitelial.

[EN] Colon cancer is the most common malignant neoplasm to be present in the digestive tube and, despite the unceasing research, one of the most prevalent diseases worldwide. The risk of developing it dependds on a series of factors such as age and diet, but it is usually a genetic disease that results from oncogene overexpression and inactivity of tumor supressor genes. Tumor recurrence and metastasis, along with a lack of highly active agents, mark the neeed for new therapies with specific focuses to ficght the illness. Therapy seen as a treatment method is more and more present in treating and preventing carcinogenesis. This is the reason why undestanding the celular processes that lead to cancer development and the mechanisms involved in its dissemination can allow the study of new therapeutic options. In this Final Degree Project, the role of boron and its transporter (NaBC1) in two cell lines of colorectal adenocarcinoma SW480 (adherent and metastatic) has been evaluated. Using different concentrations of diluted boron in the culture medium, cell viability studies have been performed at different times for the evaluation of the possible cytotoxic effects of boron on these cancer cell lines. Subsequently, 2D biomaterial platforms capable of presenting covalently anchored boron in the solid phase were used. In this way, we have studied the role of the boron transporter in the behavior of colon cancer cells, and its involvement in the phenomena of epithelial-mesenchymal transition (EMT) as well as its relationship with other membrane proteins such as fibronectin-binding integrins and growth factor receptors (GFR) after their permanent activation. For this purpose, immunofluorescence assays of typical EMT markers, integrins and NaBC1 have been performed to evaluate their expression in the absence/presence of boron, as well as their colocalization with integrins and GFRs. These studies will provide some knowledge to decipher the role of boron's transporter in these types of neoplasia. The obtained results will allow us to contemplate new therapeutic objectives for this type of epithelial cancer.