Análisis del efecto inmunosupresor FK506 sobre la ruta SNF de levadura

Abstract

[ES] El gran éxito registrado en los transplantes en este último siglo se debe principalmente a la introducción de las drogas inmunosupresoras como Tacrolimus (FK506). Las nuevas terapias inmunosupresoras, al atajar eficazmente la respuesta linfocitaria, han disminuido considerablemente la incidencia de episodios de rechazo agudo en los transplantes, aumentando la supervivencia del injerto. De los efectos secundarios, la diabetes mellitus de novo post-transplante (DMPT) es uno de los mas relevantes. Estudios previos demostraron en un modelo de rata que el efecto diabetógeno inducido por FK506 parecía deberse a un defecto secretor de insulina por la célula beta. El presente proyecto de investigación tiene como objetivo fundamental identificar nuevos mecanismos de FK506 que tengan relevancia en el perfil no terapéutico del fármaco. En estudios previos se vio una relación entre FK506 y la ruta SNF en levadura. Para abordar este objetivo se realizaron ensayos genéticos y bioquímicos sobre los mutantes de la ruta SNF y SEC tras la administración de FK506 a diferentes dosis: Hemos descubierto una interacción clara entre FK506 y la ruta SNF, a nivel de los mutantes snf2 y snf12. Hemos confirmado este hallazgo con ensayos bioquímicos de la actividad invertasa. Es importante recalcar que tanto Snf2p, como Snf12p, son subunidades del complejo remodelador de cromatina SWI/SNF. Además hemos observado que esta interacción podría mediarse a través de las inmunofilinas FPR1 y FPR2. En conjunto, estos hallazgos sugieren que la ruta SNF podría estar implicada en el efecto diabetógeno de FK506.

[EN] The great success achieved in transplantation in the last century is due mainly to the use of immunosuppressive drugs, such as tacrolimus (FK506). The new immunosuppressive therapies have greatly reduced the incidence of acute rejection in transplantation, because of the inhibition of lymphocyte response, increasing graft survival. The main side effect is the diabetes mellitus de novo post-transplant (PTDM). Previous studies showed that FK506 had a diabetogenic effect in a rat model. This effect seems to be a defect in the insulin-secreting of the beta cell. The aim of this research project is to identify new FK506 mechanisms which are not involved in the therapeutic profile. Previous studies showed a relationship between FK506 and path SNF in yeast. In order to address this objective, we performed genetic and biochemical tests to study mutants of the route SEC and SNF treated by FK506: We found a interaction between FK506 and SNF route, mutants snf12 and Snf2. We have confirmed this finding with biochemical assays for invertase activity. Importantly, both Snf2p as Snf12p are subunits of chromatin remodeling complex SWI / SNF. We have also observed that this interaction could be mediated through inmunophilins FPR1 and FPR2. Taken together, these findings suggest that the route SNF could be involved in the diabetogenic effect of FK506.