Desarrollo de un diluyente libre de antibióticos para inseminación artificial en conejos

Abstract

[ES] La aplicación generalizada, no regulada y no terapéutica de antibióticos ha llevado a la aparición de bacterias multirresistentes. Como resultado, la Organización Mundial de la Salud ha reconocido este problema como una de las diez principales amenazas para la salud pública mundial. La inseminación artificial (IA) es una tecnología crucial a nivel mundial en la cría de ganado. La IA se emplea aproximadamente en el 90% de la reproducción de ganado en Europa, utilizando semen fresco. Para ello, se requiere la adición de agentes antimicrobianos para controlar la proliferación bacteriana. Sin embargo, recientes directrices gubernamentales sugieren que el uso de antibióticos en tales prácticas probablemente será prohibido en un futuro próximo. Este TFM consistirá en desarrollar un diluyente libre de antibióticos para conejos. Para ello, se determinará la actividad antimicrobiana de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA, 20 mM), quitosano (biopolímero natural, 0.05%) y la combinación de ambos (20 mM+0.05%). En primer lugar, se determinará su actividad antibacteriana utilizando Enterococcus faecalis previamente aislado del semen de conejo a una concentración de 10^4 UFC/mL. Posteriormente, se evaluará su actividad sobre la calidad espermática in vitro (motilidad, incluyendo la cinética del movimiento espermático mediante un software CASA, y la viabilidad mediante la técnica de fluorescencia). Finalmente, se llevarán a cabo inseminaciones para determinar su efecto sobre el tamaño de camada.

[EN] The widespread, unregulated, and non-therapeutic application of antibiotics has led to the emergence of multidrug-resistant bacteria. As a result, the World Health Organization has recognized this problem as one of the top ten threats to global public health. Artificial insemination (AI) is a crucial technology in livestock breeding worldwide. AI is used in approximately 90% of cattle breeding in Europe, using fresh semen. This requires the addition of antimicrobial agents to control bacterial growth. However, recent government guidelines suggest that the use of antibiotics in such practices is likely to be banned in the near future. This TFM will consist of developing an antibiotic-free diluent for rabbits. For this purpose, the antimicrobial activity of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, 20 mM), chitosan (a natural biopolymer, 0.05%), and the combination of both (20 mM + 0.05%) will be determined. First, their antibacterial activity will be determined using Enterococcus faecalis previously isolated from rabbit semen at a concentration of 10^4 CFU/mL. Subsequently, their effect on sperm quality in vitro (motility, including sperm movement kinetics using CASA software, and viability using the fluorescence technique) will be evaluated. Finally, inseminations will be carried out to determine their effect on litter size.