Factors affecting the in vitro embryo production in cattle associated to ovum pick up sistem

Abstract

La producción de embriones mediante la recuperación de ovocitos inmaduros por ovum pick up (OPU), y su posterior maduración, fecundación y cultivo en el laboratorio in vitro, presenta numerosos beneficios para optimizar el potencial reproductivo, tanto de hembras como de machos. Además, frente a la superovulación convencional mediante tratamiento hormonal y la recogida de embriones in vivo, la producción in vitro de embriones (PIVE) con ovocitos de OPU ofrece considerables ventajas. Sin embargo, actualmente la PIVE continua siendo ineficiente e incapaz de producir embriones de calidad similar a los in vivo, lo cual ha limitado una aplicación más amplia de esta tecnología. Así pues, el objetivo de esta tesis fue la optimización de la PIVE en ganado vacuno, condicionado por las peculiaridades y deficiencias de la PIVE cuando los ovocitos son recuperados por la técnica de OPU. Con este fin, cinco experimento se llevaron a cabo en esta tesis. En el primero de ellos se estudió el efecto del fluido oviductal bovino (FOb) sobre el desarrollo y la calidad embrionaria (Experimento 1). Las fases del proceso de PIVE en las cuales el cultivo de ovocitos/embriones, bien individualmente o bien en número reducido, pudiera perjudicar el posterior desarrollo hasta el estadio de blastocisto y/o a su calidad, se estudiaron en el Experimento 2. En el Experimento 3 se testó si el desarrollo y la calidad de embriones cultivados in vitro en número reducido podría ser mejorada con la adición conjunta de factor de crecimiento epidérmico, insulina, transferrina y selenio (FCE-ITS) o por el sistema de cultivo de embriones llamado well of well (WOW). Las propiedades protectoras de la melatonina frente a los daños causados por el estrés oxidativo, subsecuentes de las condiciones de PIVE o de un estrés térmico durante la maduración ovocitaria, fueron evaluadas en el Experimento 4. Por último, en el Experimento 5 usamos ovocitos recolectados por OPU para evaluar el efecto del semen sexado sobre