Efecto de la vitrificación embrionaria sobre el proteoma de hígados de conejo

Abstract

[EN] Preimplantation mammalian embryos are sensitive to environmental conditions. However, they are able to adapt to environmental changes through mechanisms which include modification of gene expression (reprogramming). Oocytes and embryos cryopreservation is considered an important tool in assisted human reproduction, but its neutrality has been questioned recently. Moreover, little is known about long-term effects on adult individuals and their offspring. Then, the aim of this study was to evaluate whether early embryos vitrification induces long-term protein disorders in adult livers. For this purpose, 10 samples fron adult rabbit livers (8 months), which came from 3-days embryos (5 of them were vitrified) were taken, transferred to recipient females and checked until adulthood. A proteomic study was performed using two-dimensional electrophoresis and liquid chromatrography coupled to tandem mass spectrometry. Subsequently, functional annotation was carried out by comparing the sequences to NCBI databases. Of the nine spots found, four were overexpressed in embryo vitrified samples and four underexpressed. One of the spots was represented by a single protein named catalasa (CAT). This protein reduces the levels of hydrogen peroxide in liver in order to decrease oxidative stress effects. Remaining spots contained a protein mixture. Therefore, it was concluded that vitrification may have long-term effects on adult individuals and it should not be considered as a neutral practice.

[ES] Los embriones preimplantacionales de mamíferos son sensibles a las condiciones ambientales de su entorno, sin embargo son capaces de adaptarse a las alteraciones del ambiente mediante mecanismos que incluyen la modificación de su expresión génica (reprogramación). La crioconservación de óvulos y embriones es considerada una herramienta importante en la reproducción humana asistida, pero su neutralidad ha sido recientemente cuestionada y poco se sabe hasta la fecha a cerca de los efectos que tiene a largo plazo sobre los individuos adultos y la descendencia. Por ello, el objetivo de este trabajo fue evaluar si la vitrifiación de embriones tempranos induce alteraciones proteicas a largo plazo en el hígado de individuos adultos. Para ello se utilizaron 10 muestras de hígados de conejo adulto (8 meses) procedentes de embriones de 3 días (5 de ellos vitrificados), transferidos a hembras receptoras y seguidos hasta su edad adulta. Se realizó un estudio proteómico mediante electroforesis bidimensional y cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem. Posteriormente se realizó la antocación funcional comparando las secuencias con las bases de datos de la NCBI. De los nueve spots encontrados, cuatro estaba sobreexpresados en las muestras de embriones vitrificados y cuatro subexpresados Uno de los spots estaba representado por una proteína única, la catalasa (CAT), la cual reduce los niveles de peróxido de hidrógeno en el hígado para disminuir los efectos debidos al estrés oxidativo. El resto de spots contenían mezcla de proteínas. Por tanto, se concluyó que la vitrificación puede tener efectos a largo plazo sobre los individuos adultos y no debería ser considerada como una técnica neutral.