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Aspectos básicos y aplicados de la inducción de embriogénesis en microsporas de pimiento y colza

RiuNet: Institutional repository of the Polithecnic University of Valencia

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Aspectos básicos y aplicados de la inducción de embriogénesis en microsporas de pimiento y colza

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dc.contributor.advisor Seguí Simarro, José María es_ES
dc.contributor.author Parra Vega, Verónica es_ES
dc.date.accessioned 2015-03-31T06:01:31Z
dc.date.available 2015-03-31T06:01:31Z
dc.date.created 2015-01-23 es_ES
dc.date.issued 2015-03-31 es_ES
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10251/48518
dc.description.abstract La embriogénesis derivada de microsporas es la ruta androgénica más empleada para la obtención de individuos dobles haploides (DHs), 100% homocigotos, que pueden ser utilizados como líneas puras. Este proceso es una alternativa biotecnológica a los programas clásicos de mejora que permite reducir el tiempo y los recursos necesarios para la obtención de híbridos comerciales. Gracias a los avances realizados en los últimos 30 años, hay determinadas especies que pueden ser consideradas modelo debido a la elevada eficiencia que presentan en la obtención de individuos DHs. Sin embargo, aun existen muchas especies, interesantes desde un punto de vista agrícola y comercial, que permanecen recalcitrantes a la embriogénesis de microsporas. Debido al elevado potencial biotecnológico de esta técnica es fundamental mejorar el proceso en este tipo de especies en las que la androgénesis no está puesta a punto. Para ello es esencial realizar estudios en los que se combine un enfoque más aplicado, tratando de conseguir las condiciones experimentales más adecuadas, y en paralelo, un enfoque más básico, orientado a investigar las bases de la reprogramación de las microsporas y de este modo, tener una mayor posibilidad de influir en el proceso. En esta Tesis se han empleado ambos enfoques, empleando la colza como especie modelo y el pimiento como especie recalcitrante a la androgénesis. En pimiento, el estudio de factores clave para la inducción de la androgénesis nos ha permitido optimizar un protocolo de cultivo de anteras aplicable a diferentes genotipos. Proponemos el uso combinado de la relación sépalo/yema (80-90% de la yema cubierta por los sépalos) junto con la pigmentación de las anteras (extremo apical morado) como marcadores morfológicos fiables y fáciles de medir para determinar qué yemas y anteras contienen las microsporas en su estadio idóneo para la inducción. También se ha demostrado que la presencia de callos de origen somático es más dependiente de las condiciones de cultivo que del genotipo, lo cual nos ha permitido obtener un protocolo que reduzca la presencia de estos callos e incremente el número de embriones obtenidos. En los estudios de investigación básica realizados con colza, el uso de la fijación por alta presión combinada con la criosustitución ha permitido observar cambios ultraestructurales en las microsporas inducidas nunca antes descritos. Se ha estudiado la arquitectura y composición de las paredes celulares que se forman de novo en las microsporas embriogénicas y se han observado paredes celulares incompletas y deformes que podrían estar favoreciendo fenómenos de fusión nuclear, que a su vez da lugar a la duplicación cromosómica típica de los DHs. Se ha comprobado que estas paredes presentan elevados niveles de calosa y ausencia de celulosa. También se ha estudiado la arquitectura de diferentes orgánulos presentes en las microsporas recién inducidas y se ha demostrado que los plastidios presentes en las microsporas embriogénicas actúan como plastolisomas. Estos estudios ultraestructurales han servido para extraer dos nuevos marcadores de embriogénesis: la presencia de calosa en las nuevas paredes y en las placas celulares en formación y plastolisomas que posiblemente actúen como parte de un mecanismo más general de limpieza del citoplasma, en paralelo a la reprogramación. es_ES
dc.language Español es_ES
dc.rights Reserva de todos los derechos es_ES
dc.subject Androgénesis es_ES
dc.subject Brassica napus es_ES
dc.subject Capsicum annuum es_ES
dc.subject Calosa es_ES
dc.subject Celulosa es_ES
dc.subject Citocinesis es_ES
dc.subject Criométodos es_ES
dc.subject Cultivo in vitro es_ES
dc.subject Cultivo de anteras es_ES
dc.subject Cultivo de microsporas es_ES
dc.subject Doble haploide es_ES
dc.subject Embriogénesis es_ES
dc.subject Desarrollo floral es_ES
dc.subject Longitud de antera es_ES
dc.subject Longitud de yema es_ES
dc.subject Microgametogénesis es_ES
dc.subject Microspora es_ES
dc.subject Microscopía confocal es_ES
dc.subject Microscopía electrónica es_ES
dc.subject Microsporogénesis es_ES
dc.subject Marcadores morfológicos es_ES
dc.subject Plastidios es_ES
dc.subject Plastolisoma es_ES
dc.subject Polen es_ES
dc.subject Tratamiento de estrés es_ES
dc.subject Electron Microscopy Service of the UPV es_ES
dc.subject.classification GENETICA es_ES
dc.title Aspectos básicos y aplicados de la inducción de embriogénesis en microsporas de pimiento y colza es_ES
dc.type Tesis doctoral es_ES
dc.identifier.doi 10.4995/Thesis/10251/48518 es_ES
dc.rights.accessRights Abierto es_ES
dc.contributor.affiliation Universitat Politècnica de València. Departamento de Biotecnología - Departament de Biotecnologia es_ES
dc.description.bibliographicCitation Parra Vega, V. (2015). Aspectos básicos y aplicados de la inducción de embriogénesis en microsporas de pimiento y colza [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. doi:10.4995/Thesis/10251/48518. es_ES
dc.description.accrualMethod TESIS es_ES
dc.type.version info:eu-repo/semantics/acceptedVersion es_ES
dc.relation.pasarela 8024 es_ES


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