Expression, localization and acetylation level of heterogeneous ribonucleoproteins (hnRNPs) depending on KRAS mutational status in colorectal cancer cell lines

Abstract

[EN] Mutations in KRAS have been associated with resistance to anti-EGFR drugs and with a worse prognosis in colorectal cancer (CRC). KRAS membrane is a GTPase that transduce the extracellular signal from the cytoplasms to the nucleus. KRAS mutations occur almost exclusively in codons 12, 13 and 61 preventing the hydrolysis of GTP, which keeps the protein in a constitutively active state. KRAS constitutive deregulation acts in several pathways as mainly RAF/MEK/ERK and PI3K, which eventually increase the histone acetyltransferases (HATs/KATs) activity this might be involved in tumor development. Previous laboratory results have shown an increase in acetylation of several members of the family of hnRNPs, proteins involved in pre-mRNA analyzed in CRC cells that differ in the mutational status of KRAS. In this project we propose to determine expression levels of hnRNPs, degree of acetylation, as well as its subcellular localization in three cell lines that differ in the KRAS mutational status. Furthermore, the signaling pathways involved in the hnRNPs acetulacion be analyzed.

[ES] Las mutaciones en KRAS se han relacionado con la resistencia a fármacos anti-EGFR y con un peor pronóstico en el cáncer colorectal (CCR). KRAS es una GTPasa de membrana que transduce la señal extracelular desde el citoplasma al núcleo. Las mutaciones de KRAS ocurren casi exclusivamente en los codones 12, 13 y 61 evitando la hidrólisis del GTP, lo cual mantiene la proteína en un estado constitutivamente activado. La activación constitutiva de KRAS produce la desregulación de múltiples vías efectoras como principalmente RAF/MEK/ERK y PI3K, que conduce finalmente a un aumento de la actividad acetiltransferasa de acetilasas, lo cual podría estar implicado en el desarrollo tumoral. Resultados previos del laboratorio han demostrado un aumento en la acetulacion de varios miembros de la familia de las hnRNPs, proteínas implicadas en el procesamiento de pre-mRNA, en células de CRC que difieren en el estado mutacional de KRAS. En este proyecto nos proponemos determinar los niveles de expresión de las hnRNPs, su grado de acetilación, as como su localización subcelular en tres líneas celulares 3 que difieren en el estado mutacional de KRAS. Por otro lado, se analizaran las vías de señalización implicadas en la acetilacion de las hnRNPs.