Estudios bioquímicos y moleculares en el mutante C BF5 en levadura

Abstract

[EN] Dyskeratosis congenita is a rare disease that is caused by defects in the telomere maintenance machinery, resulting in the presence of shortened telomeres in highly active regenerative tissues such as bone marrow or skin. Several DKC1 mutations are responsible for the appearance of the disease. The gene encodes the nucleolar protein DKC1 or dyskerin, which associates with snoRNAs (small nucleolar RNAs) in the H/ACA snoRNP complex. This gene has an ortholog in yeast called CBF5. Given the simplicity and potential in the management of the Saccharomyces cerevisiae yeast, we have used the haploinsuficient mutant cbf5 as a model of the disease. In past studies, we analyzed the functional transcriptome of a cbf5 mutant strain in order to obtain information that may be useful for future therapeutic approaches by designing specific nanotechnological molecular gates. The obtained results showed that our mutant presents a hyper-secretory phenotype, as well as a certain amount of resistance to endoplasmic reticulum stress. In this work, we have demonstrated the existence of an activation of several pathways related to nutrient stress response and reticulum stress response (Unfolded Protein Response). More studies of the altered signaling pathways in this model will allow identifying possible therapeutic targets which may work as molecular gates.

[ES] La disqueratosis congénita es una enfermedad rara que se origina a través de defectos en la maquinaria de mantenimiento del telómero, resultando en la presencia de telómeros acortados en tejidos de alta actividad regenerativa como la médula ósea o la piel. Varias mutaciones en el gen DK1 son las responsables de la aparición de la enfermedad. El gen DKC1 codifica una proteína nucleolar, la disquerina, asociada a snoRNAs (small nucleolar RNAs) en el complejo H/ACA snoRNP. Este gen cuenta con un ortólogo en levadura denominado CBF5. Dada la sencillez y potencialidad en el manejo de la levadura Saccharomyces cerevisiae, hemos utilizado el haploinsuficiente cbf5 como modelo de estudio de la enfermedad. En pasados estudios, hemos realizado un análisis transcriptómico funcional de la cepa mutante cbf5 con el objetivo de obtener información que pueda ser útil para un posterior enfoque terapéutico mediante el diseño de puertas moleculares nanotecnológicas específicas. Los primeros resultados mostraron un fenotipo hiper-secretor, así como un posible fenotipo de resistencia a condiciones de estrés de retículo. En el presente trabajo, hemos demostrado la activación de las rutas de respuesta frente a estrés de nutrientes mediado por la ruta GCN, y así estrés de retículo (Respuesta a proteínas desplegadas). Un estudio más pormenorizado de las rutas de señalización alteradas en este modelo permitirá identificar posibles dianas terapéuticas que sirvan como puertas moleculares