Análisis del estado mutacional de los genes RAS en cáncer colorrectal metastásico: correlación entre tejido y biopsia líquida. l

Abstract

[EN] Mutations in RAS genes (KRAS and NRAS) in colorectal cancer are known to confer resistance to anti-EGFR monoclonal antibodies (cetuximab and panitumumab). Although standard assessment is performed on tumor tissue samples, liquid biopsy offers a non-invasive method to analyze tumor-specific mutations. Analysis of circulating tumor DNA has proven to be a proficient method for mutation detection, able to .track tumor evolution. In this work, we have compared the performance of our standard technique forRAS status determination on tumor tissue, pyrosequencing, with ctDNA analysis by BEAMing, a digital PCR system based on Beads-Emulsion-MagneticsAmplification, in a selected cohort of 30 patients. Furthermore, we explored the effect of RAS mutations in clinicopathological variables and survival parameters. We found a strong concordance between the two techniques. No statistically significant correlation ofRAS mutations with clinicopathological features or survival parameters was found. In conclusion, we consider that BEAMing technology is an optimal method for molecular diagnosis ofRAS mutations in advanced CRC.

[ES] El cáncer colorrectal es el tercer tipo de cáncer más común del mundo, con una incidencia estimada de más de 1,36 millones de nuevos casos anuales. Se calcula que cada año causa en el mundo unas 694.000 muertes, lo que supone un 8,5% de todas las muertes por cáncer y la cuarta causa más común de muerte por esta enfermedad. Cerca del 55% de los casos de cáncer colorrectal se diagnostican en zonas desarrolladas del planeta, y las tasas de incidencia y mortalidad son considerablemente más altas en los hombres que en las mujeres Las mutaciones activadoras en los genes RAS juegan un papel importante en este tipo de tumores y se utilizan en la actualidad para la selección de pacientes candidatos a recibir terapias anti-EGFR. Las terapias anti‐EGFR tienen actividad en pacientes con cáncer colorrectal metastásico (CCRm) aumentando la tasa de respuesta en aquellos que tienen KRAS nativo. Hasta el momento, las determinaciones se realizan en las muestras de tejido obtenidas mediante cirugía o por endoscopia de las lesiones tumorales, lo que supone un método invasivo, y la imposibilidad de realizar biopsias seriadas para poder valorar los cambios que pueden experimentar las células cancerosas a lo largo de la evolución de la enfermedad. Un gran avance hacia la medicina de precisión es el poder contar con un método rápido, menos invasivo, sensible y específico para la detección de las alteraciones moleculares presentes en las células cancerosas. Así la biopsia líquida, basada en el análisis de muestras de sangre de los pacientes, abre la oportunidad no solo de realizar una determinación diagnóstica, sino también de monitorizar la respuesta a los tratamientos y la evolución del tumor. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo consiste en el análisis del estado mutacional de los genes RAS (KRAS y NRAS) en muestras de tejido y de sangre de pacientes con CCRm, comparando las técnicas utilizadas para analizar estos diferentes tipos de muestra (pirosecuenciación vs PCR digital basada en tecnología BEAMing), valorando la sensibilidad de la determinación en sangre y su posible implantación en la práctica clínica. Para ello se analizarán muestras pareadas de tejido y sangre de pacientes con CCRm que hayan aceptado voluntariamente participar en el estudio. Se recogerán los datos clínico-patológicos más relevantes, así como datos de respuesta a los tratamientos recibidos y datos de supervivencia de los pacientes incluidos en el estudio. La determinación de mutaciones en los genes RAS en muestras de tejido tumoral se realizará mediante técnicas de pirosecuenciación, mientras que las determinaciones en biopsia líquida se realizarán sobre ADN extraído de plasma mediante una técnica de gran sensibilidad como es la PCR digital (tecnología BEAMing). Se realizarán análisis de correlación entre las metodologías utilizadas, así como con las variables clinico-patológicas en la cohorte de pacientes estudiada.