Significación clínica de los reordenamientos MYC, BCL2 Y BCL6 en el linfoma difuso de célula grande. Correlación de las técnicas de fish e inmunohistoquimia

Abstract

[EN] Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is the most common subtype of non-Hodgkin lymphoma representing around 30% to 40% of all newly diagnosed lymphomas. DLBCL is clinically, morphologically and biologically a heterogeneous disease reflected in the highly variable clinical course. Approximately 5 to 15% of DLBCL cases have been reported to carry MYC/8p24 translocations, whereas 19-38% of cases show MYC low copy number gains and are often seen with complex karyotypes. Recent studies have suggested that the impact of MYC is strongly influenced by BCL2/18q21 rearrangement (double-hit) and/or BCL6/3q27 (tripe hit). The evidence of these translocations, MYC and BCL2 in particular, correlates to the protein high expression in a significative percentage of malignant cells. Break apart FISH probes are considered to be the most sensitive assay for identifying chromosomal rearrangements and can perform in fresh tissue or in paraffin sections. More recently monoclonal antibodies that specifically recognize these proteins have facilitated the recognition of these alterations. However, the relationship between translocation and expression for MYC, BCL2 and BCL6 is still unknown, and it is not clear what proportions of MYC, and BCL2 by immunohistochemical analysis is predictive for overall survival. The purpose of this study was to clarify the clinical prognostic value of immunostaining and chromosomal translocation of MYC, BCL2 and BCL6 by FISH among the retrospective series diagnosed as DLBCL in Clínic Hospital of Valencia.

[ES] El linfoma difuso de célula grande (LDCG) es el linfoma no Hodgkin más frecuente y representa el 30%-40% de los linfomas. El LDCG es desde el punto de vista clínico, morfológico e histológico una enfermedad heterogénea que se refleja en su variable curso clínico. Aproximadamente el 5-15% de los LDCG presentan una translocación cromosómica que afecta al locus MYC/8q24 y en el 19-38% lo que ocurre son ganancias o pérdidas de material genético a este nivel que a menudo se asocia a cariotipos complejos. Estudios recientes apuntan a que su implicación pronóstica está directamente influenciada por la concurrencia de reordenamientos de BCL-2/18q21 (double-hit) y/o de BCL6/3q27 (triple hit). La presencia de translocaciones en estos genes, particularmente en MYC y BCL2 se asocia estrechamente a la sobreexpresión de la proteína en porcentajes significativos de la celularidad neoplásica. El empleo de técnicas de hibridación in situ fluorescente (FISH) con la utilización de sondas específicas de ¿Split¿ que flanquean el punto de ruptura sobre muestras de tejido en fresco o en parafina constituye la técnica más idónea para determinar este marcador biológico. Recientemente disponemos de anticuerpos monoclonales específicos para reconocer estas alteraciones, aunque todavía no ha sido validado su punto de corte. El objetivo de este proyecto es determinar el valor pronóstico de la expresión inmunohistoquímica de MYC, BCL2 y BCL6 y del estudio de las translocaciones de MYC, BCL2 y BCL6 mediante FISH en la serie histórica de linfomas difusos de célula grande diagnosticados en el Hospital Clínico Universitario de Valencia. Para ello se recurrirá a las muestras de tejido ganglionar en fresco procesadas para su cultivo y posterior estudio citogenético en el momento del diagnóstico. En los casos en que no esté disponible, se procederá a realizar tissue microarrays (TMAs) de las muestras representativas. Se realizará lectura manual y automatizada de las muestras. Paralelamente se recogerán los datos clínicos y biológicos de los pacientes objeto de estudio y se procederá a realizar los correspondientes análisis multivariantes para determinar su implicación en la supervivencia global.