Efecto del tipo genético materno sobre el embrión, la supervivencia fetal y las características de crecimiento en conejos

Abstract

[EN] Nowadays , the influence of maternal and prenatal embryonic genotype on prenatal survival is not clear. However, it is known that mother’s genotype (uterine environment) can affects fetal and postnatal development. While several studies have referred prenatal survival with the maternal genotype, others suggest that the embryonic genotype may modify the uterine environment. Consequently, the prenatal survival depends not only of maternal factors. These effects have been shown in t he rabbit, however, this study aimed to evaluate the effect of different maternal environments on the embryonic and gestational survival. In addition, we also study the effect of this maternal environments in the rabbit’s growth at prenatal and postnatal s tage. The maternal effect was determined by comparing three different genotypes, two of them selected by reproductive characters, but with different genetic selection methods (genotype A and V), and the third selected by average daily gain during fattening (genotype R). To rule out the effect of embryonic genotype, all embryos was obtained from genotype R. Donor rabbit (n = 39) were superovulated with a subcutaneous injection of corifollitropin alfa (0.75 μg/kg, Elonva®). Sixty hours later, they were insemi nated (AI) and induced to ovulate, recovering embryos 72 h after AI. Only, the females who provided at least 21 embryos was classified as transferable and used as donors (n = 13). Embryos were distributed in the three receptor genotypes (R, A and V), trans ferring between 7 to 14 embryos per recipient. In total, 453 embryos (151 in each genotype) were transferred by laparoscopy in 39 females. Embryonic survival (embryo implanted/embryos transferred), gestational survival (kits born alive/embryos transferred) and fetal loss (rabbits unborn/implanted embryos) was determined by laparoscopy at 10 th day of gestation. In addition, the size of the fetus was determined during gestation by ultrasound (My Lab 70 x V6 portatil - Esaote) at intervals of 2 days, starting on day 10 and ending on day 27. Litter size was determined and each newborn was individually identified by microchip and weighted. The daily middleweight gain (DMG) was estimated until the age of 63 days, and also the survival rate during this stage was calc ulated. DMG was calculated during the lactation and fattening (until 63 days). Our results shown that embryonic survival rate was influenced by maternal genotype, being higher in the maternal genotypes (A and V) than in the paternal genotype R (0.62±0.04 a nd 0.58±0.04 vs 0.47±0.04 for genotype A and V vs R, respectively). However, in the survival gestational and fetal losses any effect was observed. On prenatal growth, any effect between 10 to 19 days of pregnant was noticed. However, from day 21 of pregnan t, the fetus in the uterine environment of R genotype increase their body length, maintaining this difference until the birth. Although any effects were observed on litter size, the weight at birth showed a higher value for the fetus developed in the uteri ne environment of genotype R (72.7±2.2g vs 67.0±2.1g and 61.7±2.0g for R vs genotype A and V, respectively). During lactation, R genotype reached the highest DMG (21.1±0.9 g/d vs 18.7±0.8 g/d and 18.3±0.7 g/d, for genotype R vs genotype A and V, respective ly). However, during the fattening stage, the postnatal survival and DMG were not affected by maternal effect. In conclusion, maternal effect has an effect on embryonic survival but not in gestational survival, fetal loss and postnatal survival. In additio n, the maternal effect on the fetal growth and until lactation was observed, later this effect is compensated during fattening

[ES] La reproducción es un fenómeno esencial para la supervivencia de las especies y por tanto, la biología y la tecnología de la reproducción tienen un papel esencial en la conservación de la biodiversidad. También ofrece herramientas que potencian y facilitan la aplicación de los métodos de mejora tanto cuantitativos como moleculares (Roldán y Garde, 2002). El estudio de los componentes tamaño de camada en conejos es uno de los caracteres tradicionalmente utilizados en la selección de líneas maternas, ello puede ayudar a entender mejor su control genético. Así por ejemplo las pérdidas prenatales de la línea seleccionada por velocidad de crecimiento (línea R) alcanzan el 50%; mientras en líneas maternas y conejas hibridas éstas pueden situarse entre un 20 y un 30% (García y Baselga, 2002; Mocé et al., 2010; Vicente et al, 2013). Por ello, se considera que es posible tener mejores resultados aplicando las actuales biotecnologías de la reproducción (sincronización, superovulación, inseminación artificial, transferencia de embriones, cirugía de mínimo acceso y ultrasonografía), por el hecho de que ya están estandarizados estos protocolos en esta especie, minimizamos el tiempo y tenemos un mejor nivel de control de las condiciones experimentales para determinar el efecto del tipo genético materno en los embriones, la supervivencia del feto y características de crecimiento. El éxito o fracaso de la reproducción en conejos depende de varios factores como son: la producción, la genética, el manejo, la sanidad y la alimentación; entre otros (es multifactorial). Un ejemplo son las características del crecimiento y canal en líneas maternales, que se ha demostrado que pueden estar influenciados por los efectos uterinos, efectos del desarrollo posnatal y otros efectos (Cowley et al., 1989). También la tasa de supervivencia prenatal se ve afectada por varios factores genéticos y ambientales que alteran el desarrollo normal del embrión, el medio ambiente maternal para soportar la fertilización normal y el desarrollo de los embriones, la placenta y el feto, o afectar a la relación necesaria entre el embrión y el endometrio maternal (Wilmut et al., 1986). En un estudio reciente, Vicente et al. (2012) demostraron las influencias de tipo genético embrionarias en ambas tasas (la de implantación y supervivencia del feto), siendo la más afectada la tasa de implantación.

OBJETIVOS Evaluar la influencia genética materna sobre el desarrollo embrionario. Además se caracterizará el desarrollo prenatal y postnatal en tres ambientes uterinos maternos, así como la supervivencia del feto, las características de crecimiento y características de la canal.

METODOLOGÍA Y PLAN DE TRABAJO Este trabajo se desarrollará desde septiembre del 2015 hasta mayo del 2016. Se llevará a cabo un experimento en el que se utilizarán 16 conejas de diferentes orígenes pertenecientes a una línea de crecimiento (R) las que serán superovuladas con un tratamiento de FSH porcina combinado con LH recombinante humana. A las mismas se les realizará la inseminación artificial y una vez que trascurran 72 horas, se procederá a recuperar los embriones in vivo (estadio de 2-4 células) de cada donante mediante la técnica de laparoscopía; dichas biotecnologías se realizarán según los procedimientos de Vicente y Jiménez (2012). En torno a 150 embriones frescos (obtenidos a partir de la misma hembra inseminada serán evaluados en diferentes ambientes uterinos), transfiriéndose por vía laparoscópica a nivel oviductal en dos líneas maternas (A y V) y sobre hembras de la línea crecimiento (línea R), conformando con ello los tres grupos de conejas receptoras; no existiendo más de 12 horas de asincronía entre las donantes y las receptora, evaluando a partir de ese momento su desarrollo prenatal y postnatal en los tres ambientes maternos. A las conejas receptoras se realizará en