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Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas

RiuNet: Institutional repository of the Polithecnic University of Valencia

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Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas

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dc.contributor.advisor Montoya Baides, Ángel es_ES
dc.contributor.advisor Manclus Ciscar, Juan José es_ES
dc.contributor.author Plana Andani, Emma es_ES
dc.date.accessioned 2010-07-26T07:05:17Z
dc.date.available 2010-07-26T07:05:17Z
dc.date.created 2010-07-06T08:00:00Z es_ES
dc.date.issued 2010-07-26T07:05:14Z es_ES
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10251/8477
dc.description.abstract El objetivo principal de esta tesis consiste en la obtención de anticuerpos recombinantes frente a los fungicidas azólicos tetraconazol, hexaconazol e imazalil, y su aplicación en la determinación de residuos de estos fungicidas en muestras agroalimentarias. Para ello, en primer lugar, se han aplicado técnicas de biología molecular para la obtención de los fragmentos recombinantes scFv (single chain fragment variable) a partir del material genético de hibridomas productores de anticuerpos monoclonales frente a los fungicidas tetraconazol, hexaconazol e imazalil. Posteriormente, dichos fragmentos se han expresado en sistemas bacterianos empleando vectores de expresión plasmídicos. Por otro lado, se ha optimizado un sistema de cribado y selección de colonias bacterianas productoras de fragmentos de anticuerpos recombinantes capaces de reconocer a los plaguicidas en estudio. Este sistema está basado en ELISAs simultáneos, competitivos y no competitivos, de la fracción soluble del anticuerpo recombinante. Finalmente, en el caso de los anticuerpos frente a hexaconazol e imazalil, se ha aplicado un protocolo de enriquecimiento cíclico denominado panning, basado en la tecnología de presentación de moléculas proteicas en la superficie de fagos (phage display). De este modo, se han obtenido anticuerpos recombinantes a partir de cada hibridoma productor de anticuerpos monoclonales. Cada anticuerpo recombinante se ha expresado tanto en su forma de proteína libre (scFv) como en forma de proteína de fusión (scFv-pIII). De igual modo, se han empleado técnicas de biología molecular para la generación de bibliotecas de fragmentos recombinantes scFv a partir del material genético de linfocitos de ratones inmunizados frente a cada uno de los tres fungicidas. En este caso, se han optimizado las condiciones tanto de la etapa de construcción de bibliotecas como del posterior proceso de enriquecimiento por panning. es_ES
dc.language Español es_ES
dc.rights Reserva de todos los derechos es_ES
dc.source Riunet
dc.subject Fungicidas es_ES
dc.subject Anticuerpos recombinantes es_ES
dc.subject Anticuerpos monoclonales es_ES
dc.subject Inmunoensayos es_ES
dc.subject Phage display es_ES
dc.subject.classification TECNOLOGIA ELECTRONICA es_ES
dc.title Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas
dc.type Tesis doctoral es_ES
dc.subject.unesco 230221 - Biología molecular es_ES
dc.subject.unesco 230216 - Inmunoquímica es_ES
dc.subject.unesco 310109 - Plaguicidas es_ES
dc.identifier.doi 10.4995/Thesis/10251/8477 es_ES
dc.rights.accessRights Abierto es_ES
dc.contributor.affiliation Universitat Politècnica de València. Departamento de Biotecnología - Departament de Biotecnologia es_ES
dc.description.bibliographicCitation Plana Andani, E. (2010). Selección y caracterización de anticuerpos recombinantes para fungicidas. Aplicación al desarrollo de técnicas inmunoanalíticas [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. doi:10.4995/Thesis/10251/8477. es_ES
dc.type.version info:eu repo/semantics/acceptedVersion es_ES
dc.relation.tesis 3304 es_ES


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