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Análisis de la red de regulación de las proteínas DELLA mediante la generación de alelos edyéticos

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Análisis de la red de regulación de las proteínas DELLA mediante la generación de alelos edyéticos

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dc.contributor.advisor Blazquez Rodriguez, Miguel Angel es_ES
dc.contributor.advisor Gómez Minguet, Eugenio es_ES
dc.contributor.author Fuster Pons, Alberto es_ES
dc.date.accessioned 2018-02-14T07:28:38Z
dc.date.available 2018-02-14T07:28:38Z
dc.date.created 2018-01-29
dc.date.issued 2018-02-14 es_ES
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10251/97843
dc.description.abstract DELLA proteins are transcriptional regulators whose degradation is induced by gibberellins (GAs), plant hormones that participate in the modulation of numerous processes of development and defense against stress. DELLA proteins are not able to bind themselves to DNA and act through the interaction with dozens of transcription factors, modulating their activity, constituting central nodes for the integration of different signaling pathways. The implication of DELLA proteins in so many processes (i) makes it difficult to study each of their functions without affecting others and (ii) reduces the possibilities of their use as a biotechnological tool. It is for this reason that the identification of edgetics alleles, versions of DELLA proteins that have lost the ability to interact with one or more proteins while maintaining them with other interactors, is especially interesting. In this work, the identification of aristic alleles of the protein DELLA GAI of Arabidopsis thaliana is proposed for the first time. To this end, a mutagenized gene library of the GAI gene was generated by low fidelity PCR and two screenings were performed by double hybrid in yeast, against ARR1 and PIF4, to find GAI versions with potential to be edgetics alleles. Finally, the interaction capacity of these candidates has been evaluated with a battery of known GAI interactors using techniques such as the double hybrid assay in yeast, identifying 46 edgetics alleles, and as a proof of concept, the behavior has been verified in plant of one of them using BiFC (Bimolecular fluorescence complementation). es_ES
dc.description.abstract Las proteínas DELLA son reguladores transcripcionales cuya degradación es inducida por las giberelinas (GAs), hormonas vegetales que participan en la modulación de numerosos procesos de desarrollo y defensa frente al estrés. Las proteínas DELLA no son capaces de unirse por sí mismas al ADN y actúan a través de la interacción con decenas de factores de transcripción, modulando su actividad, constituyendo nodos centrales de integración de diferentes rutas de señalización. La implicación de las proteínas DELLA en tantos procesos (i) dificulta el estudio de cada una de sus funciones sin afectar otras y (ii) reduce las posibilidades de su utilización como herramienta biotecnológica. Es por este motivo que resulta especialmente interesante la identificación de alelos arísticos, versiones de las proteínas DELLA que han perdido la capacidad de interacción con una o más proteínas mientras que la mantienen con otros interactores. En este trabajo se plantea, por primera vez, la identificación de alelos arísticos de la proteína DELLA GAI de Arabidopsis thaliana. Para ello se ha generado una genoteca mutagenizada del gen GAI mediante PCR de baja fidelidad y se han realizado dos rastreos por doble híbrido en levadura, frente a ARR1 y PIF4, para encontrar versiones de GAI con potencial de ser alelos arísticos. Finalmente se ha evaluado la capacidad de interacción de dichos candidatos con una batería de interactores conocidos de GAI haciendo uso de técnicas como el ensayo de doble hibrido en levadura, identificando 46 alelos arísticos, y como prueba de concepto, se ha verificado en planta el comportamiento de uno de ellos mediante BiFC (Bimolecular fluorescence complementation). es_ES
dc.language Español es_ES
dc.rights Reserva de todos los derechos es_ES
dc.subject DELLA es_ES
dc.subject GAI es_ES
dc.subject Edjetic alleles es_ES
dc.subject Alelos edyéticos es_ES
dc.subject.classification BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR es_ES
dc.subject.other Máster Universitario en Biotecnología Molecular y Celular de Plantas-Màster Universitari en Biotecnologia Molecular i Cel·Lular de Plantes es_ES
dc.title Análisis de la red de regulación de las proteínas DELLA mediante la generación de alelos edyéticos es_ES
dc.type Tesis de máster es_ES
dc.rights.accessRights Abierto es_ES
dc.contributor.affiliation Universitat Politècnica de València. Departamento de Biotecnología - Departament de Biotecnologia es_ES
dc.description.bibliographicCitation Fuster Pons, A. (2018). Análisis de la red de regulación de las proteínas DELLA mediante la generación de alelos edyéticos. http://hdl.handle.net/10251/97843 es_ES
dc.description.accrualMethod TFGM es_ES
dc.relation.pasarela 80619 es_ES


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