PRELIMINARY RESULTS OF INTRA CYTOPLASMIC SPERM INJECTION (ICSI) APPLIED ON RABBIT : A TECHNICAL NOTE

Abstract

[EN] In a foundation process of a maternal rabbit line using high selection intensities, from sorne hyper prolific females, selected as embryo donors, the subjects were very old and in an unhealthy condition (24%). An in vitro procedure to obtain embryos from this kind of females would be desirable. Sorne technical improvements used for human intracytoplasmic sperm injection (ICSI) have resulted in an enhancement of cleavage rates. This method may be applied to rabbits. Spermatozoa from ejaculated washed semen samples were immobilised in 5% PVP droplet by touching the tail and aspirated tail first into the microinjection pipette. The positioned oocyte was punctured. Sorne ooplasm was aspirated. After rupturing the plasmalema by gentle aspiration, the withdrawn ooplasm and the sperm were inserted into the oocyte. The cleavage rate of intact (86/107; 80%) oocytes was checked at 24 hours after ICSI (39/107; 36%). In vitro development up to the morulae (22/39; 56%) and blastocyst stage (5/39; 13%) were obtained.

[FR] Chez le tapín, dans la procédure permettant d'obtenir une lignée matemeUe en uti/isant la sé/ection intensive á partir de femeUes tres prolifiques, sé/ectionnées comme donneuses d'embryons, les animaux deviennent trop llgés et sont dans de mauvaises conditions sanitaires (24%). 11 paraft préférable d'utiliser un procédé in vitro pour obtenir les embryons de teUes femeUes. Des améliorations techniques utilisées pour l'injection intracytop/asmique du sperme chez f'homme (ICSI) ont amé/ioré le taux de division. Cette méthode peut étre app/iquée chez le tapín. Les spermatozordes provenant d'échantiUons d'éjaculats lavés sont immobilisés, dans une goutte d'une so/ution contenant 5% de PVP, en touchant la queue et en les aspírant par la queue dans une micro pípette á injection. L'ovocyte repéré est ponctionné. Un peu d'ovop/asme est aspiré. Aprés avoir rompu le p/asmalema par une /égére aspiration, /'ovop/asme et le sperme sont injectés dans /'ovocyte. Le taux de division d'ovocytes intacts (861107 ; 80%) est contrO/e 24 heures apres l'/CSI (391107; 36%). Le développement in vitro jusqu'au stade morula (22139; 56%) et blastocyste (5139; 13%) a été atteint.