Determinación de bacterias y genes de resistencia a antibióticos en aguas destinadas al riego de la Huerta Valenciana

Abstract

[ES] El incremento en el uso de antibióticos, tanto para humanos como para animales, está siendo uno de los mayores problemas medio ambientales y de salud pública, hoy en día. En primer lugar, los antibióticos podrían provocar efectos tóxicos en organismos no diana; además, la presencia de estos compuestos en el ambiente genera la activación de genes de resistencia en muchos microorganismos, como las bacterias. Estos genes de resistencia se pueden pasar entre bacterias por transferencia horizontal, promoviendo el incremento de bacterias resistentes en el medio y en consecuencia un aumento del riesgo de infecciones por bacterias súper resistentes. En este trabajo se analizan las aguas procedentes de cinco puntos situados en la Huerta de Valencia con el fin de detectar genes de resistencia a antibióticos en aislados de Escherichia coli, tanto a nivel fenotípico como a nivel molecular. Los puntos seleccionados para la recogida de las aguas son: Rio Turia (a la altura del Parque Fluvial), Acequia Real de Moncada (Paterna), Barranco del Carraixet (Alboraya), Acequia de Vera (Valencia) y Acequia de Rascanya (Alboraya-Almàssera). Se llevan a cabo recuentos de coliformes, aislamiento de E. coli, así como extracciones de DNA, tanto de los aislados como directamente de las aguas, para analizar mediante PCR, y posterior electroforesis, la presencia de 5 genes de resistencia: blaTEM, qnrS, tetW, sulI y ermB. Los resultados obtenidos muestran la presencia de bacterias resistentes y genes de resistencias en las muestras analizadas. Se observa una elevada presencia de bacterias resistentes a eritromicina y sulfametoxazol; el gen de resistencia que más aparece en los aislados de E. coli es el blaTEM, el cual confiere resistencia a ß-lactámicos, mientras que en las muestras de aguas hay una alta frecuencia del gen tetW, uno de los principales responsables de la resistencia a tetraciclinas.

[EN] The increase in the use of antibiotics for humans and animals is one of the major environmental and health problems nowadays. In the first place, antibiotics could provoke toxic effects in non-target organisms; furthermore, the presence of these compounds in the environment generates the activation of resistance genes in microorganisms, like bacteria. These resistance genes can pass between bacteria by horizontal transfer, promoting the increase of resistant bacteria in the medium and, consequently, the risk of super-resistant bacterial infections. In this work, water samples from five locations around the Huerta de Valencia are going to be studied with the main purpose of detecting antibiotic resistance genes in Escherichia coli isolates, by microbiological and molecular analysis. The collection points for the water samples are: the Turia river (Quart de Poblet), the Moncada (Paterna), Rascanya (Alboraya-Almàssera) and Vera (Valencia) irrigation ditches, and the Carraixet gorge (Alboraya). Counting colonies of coliforms, isolation of E. coli and DNA extraction from the direct water samples and from the isolates, was carried out to analyse the presence of five resistance genes by PCR and electrophoresis: blaTEM, qnrS, tetW, sulI and ermB. Obtained data show the presence of resistant bacteria and resistance genes in the analysed samples. There is an elevated presence of bacteria resistant to erytromycin and sulfamethoxazole; the resistance gene found most in E. coli isolates is the blaTEM, which confers resistance to ß-lactam antibiotics, whereas in the water samples there is an elevated frequency of the tetW gene, one of the genes responsible for tetracycline resistance.