Proteoma diferencial en espermatozoides y plasma seminal de conejo con diferente fertilidad

Abstract

[ES] La estimación de la calidad seminal con el objeto de elaborar dosis seminales fértiles para inseminación artificial o seleccionar los espermatozoides para los procedimientos de microinseminación como la ICSI se realiza frecuentemente en base a diferentes parámetros de los espermatozoides, entre los que destacan la motilidad y la morfología. Sin embargo, a pesar de su amplia utilización tanto en nuestra especie como en animales, se acepta que estos parámetros seminales convencionales proporcionan una pobre correlación con la fertilidad masculina. Ambas características, motilidad y morfología, dependen no sólo del proceso de espermatogénesis en el testículo sino además de las secreciones de las diferentes células epiteliales que revisten tanto el epidídimo como de las glándulas seminales, próstata y bulbouretrales que conformaran el plasma seminal. Entre estas secreciones se han observado microvesículas que contenían ARN y/ o proteínas, iones, ácidos grasos, carbohidratos o proteínas que se adhieren o se incorporan a los espermatozoides, dando lugar a la estabilización y conformación de sus membranas, facilitando la adquisición de funciones como la motilidad, contribuyendo a su capacidad fecundante y a la producción de embriones con desarrollo normal. En este contexto, el estudio del proteoma tanto de los espermatozoides como del plasma seminal es de gran interés, ya que las proteínas juegan un papel clave en el mantenimiento de la morfología espermática, patrones de motilidad, formación y reacción de acrosomas, capacitación y fertilización. Además podría permitir identificar posibles biomarcadores de calidad espermática y ayudar a comprender la secuencia, diálogo e interacción celular que permiten conformar los mejores espermatozoides. El objetivo de este estudio fue evaluar como el proteoma del plasma seminal y de los espermatozoides puede influir sobre su capacidad fecundante. Para ello se utilizará como modelo animal el conejo, elaborando dosis seminales a partir de eyaculados con parámetros similares de motilidad y morfología que serán utilizados para inseminar conejas, registrando el porcentaje de conejas gestantes y la prolificidad de las mismas. Los eyaculados se obtendrán de 10 machos, una vez comprobada sus parámetros de motilidad y morfología, se extraerá una muestra para proceder al estudio del proteoma seminal y de los espermatozoides y, se elaborarán con el resto de los eyaculados las dosis seminales para realizar las inseminaciones de acuerdo con las recomendaciones técnicas de esta especie. Por último se compararán los proteomas de las muestras de espermatozoides y plasma seminal en las que se observen diferencias en fertilidad y/o prolificidad.

[EN] The estimation of seminal quality in order to develop fertile seminal doses for artificial insemination or to select sperm for microinsemination procedures such as ICSI is often performed on the basis of different sperm parameters, including motility and morphology. However, despite their widespread use in both our species and animals, it is accepted that these conventional seminal parameters provide a poor correlation with male fertility. Both characteristics, motility and morphology, depend not only on the process of spermatogenesis in the testicle but also on the secretions of the different epithelial cells that line both the epididymis and the seminal, prostate and bulbourethral glands that make up the seminal plasma. Among these secretions have been observed microvesicles containing RNA and / or proteins, ions, fatty acids, carbohydrates or proteins that adhere or are incorporated into sperm, leading to the stabilization and conformation of their membranes, facilitating the acquisition of functions such as motility, contributing to its fertilizing capacity and the production of normally developing embryos. In this context, the study of the proteome of both sperm and seminal plasma is of great interest, as proteins play a key role in maintaining sperm morphology, motility patterns, acrosome formation and reaction, training and fertilization. In addition, it could identify possible biomarkers of sperm quality and help to understand the sequence, dialogue and cellular interaction that allow the best sperm to be formed. The aim of this study was to evaluate how the proteome of seminal plasma and sperm can influence its fertilizing capacity. To do this, the rabbit will be used as an animal model, preparing seminal doses from ejaculates with similar parameters of motility and morphology that will be used to inseminate rabbits, recording the percentage pregnant rabbits and their prolificacy. The ejaculates will be obtained from 10 males, once their parameters of motility and morphology have been checked, a sample will be extracted to proceed with the study of the seminal proteome and sperm and the seminal doses will be elaborated with the rest of the ejaculates to in accordance with the technical recommendations of this species. Finally, the proteomes of the sperm and seminal plasma samples in which differences in fertility and / or prolificity are observed will be compared.