Resumen:
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[ES] En este trabajo de fin de grado se han sintetizado nanopartículas esféricas de oro (AuNPs) con
un diámetro de 2-4 nm, las cuales han sido funcionalizadas con polietilenglicol (PEG), diferentes
proteínas (HSA, BSA, ...[+]
[ES] En este trabajo de fin de grado se han sintetizado nanopartículas esféricas de oro (AuNPs) con
un diámetro de 2-4 nm, las cuales han sido funcionalizadas con polietilenglicol (PEG), diferentes
proteínas (HSA, BSA, RatSA y RabSA) y con ambos isómeros del éster etílico del flurbiprofeno
(FBPet). Mediante técnicas como la espectrofotometría UV-vis, la fluorescencia y la fotólisis de
destello láser, se ha estudiado la fotorreactividad del complejo FBPet@proteína en distintos
medios (acuoso, con AuNPs en disolución y con proteína unida covalentemente a las AuNPs)
para poder comparar su comportamiento. Finalmente, se ha realizado un estudio de viabilidad
celular con células cancerosas de mama humana (SKBr-3) con el fin de investigar su potencial
uso en terapia u otras aplicaciones biológicas.
Para la síntesis de las nanopartículas y su funcionalización, se tomaron las cantidades óptimas
para llevar a cabo la reacción, siguiéndose el método de Brust-Schiffrin. Mediante las medidas
de los espectros de absorción UV-vis, se comprobó que las diferentes proteínas se encontraban
correctamente ancladas a las nanopartículas. Tras llevar a cabo el estudio de la fotorreactividad
de los complejos en los distintos medios, se obtuvieron diferentes resultados en función de la
proteína estudiada. En este sentido, los ensayos realizados con FBPet@HSA, muestran una
desactivación de la fluorescencia en presencia de AuNPs, cuya causa puede atribuirse a un
proceso de transferencia electrónica entre la nanopartícula y FBPet@HSA, aunque tampoco se
puede descartar la formación de un complejo en el estado excitado que no emita.
Por último, se realizaron estudios de viabilidad celular con células de cáncer de mama humana
SKBr-3. Los resultados obtenidos indican que la tasa de supervivencia de las células es menor en
presencia de AuNPs, tanto en disolución como unidas covalentemente a HSA. Asimismo, se ha
observado que existe cierta enantiodiferenciación, donde (S)-FBPet parece que induce mayor
muerte celular. No obstante, el ensayo debería repetirse con el fin de comprobar la
reproducibilidad de los resultados.
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[EN] In this work, spherical gold nanoparticles (AuNPs) with a diameter of 2-4 nm have been
synthesized and functionalized with polyethylene glycol (PEG), in addition with different
proteins (HSA, BSA, RatSA and RabSA); ...[+]
[EN] In this work, spherical gold nanoparticles (AuNPs) with a diameter of 2-4 nm have been
synthesized and functionalized with polyethylene glycol (PEG), in addition with different
proteins (HSA, BSA, RatSA and RabSA); besides, the two isomers of flurbiprofen ethyl ester
(FBPet) bound to the proteins have also been used. Spectroscopic techniques such as UV-vis,
fluorescence and laser flash photolysis have been used to investigate the photoreactivity of the
FBPet@protein complexesin different media (aqueoussolution, with AuNPs in solution and with
the protein covalently linked to the surface of AuNPs) in order to compare their behavior. Finally,
a cell viability study has been performed with human breast cancer cells (SKBr-3) in order to
investigate their potential use in therapy or other biological applications.
For the synthesis of the nanoparticles and their functionalization, optimal amounts were taken
to carry out the reaction, following the Brust-Schiffrin method. UV-vis absorption spectroscopy
was used to confirm that the different proteins were properly bounded to the nanoparticles.
After studying the photoreactivity of the complexes in the different media, different results were
obtained depending on the investigated protein. In this sense, a significant fluorescence
quenching of FBPet@HSA in the presence of AuNPs has been observed, which can be attributed
to an electron transfer process between the nanoparticle and FBPet@HSA, although it cannot
be discarded the formation of a complex in the excited state with no emission.
Finally, cell viability studies were performed with SKBr-3 human breast cancer cells. The
obtained results indicate that the cell survival rate is lower in the presence of AuNPs, both in
solution and covalently bound to HSA. Also, a slight enantiodifferentiation has been observed,
where (S)-FBPet appears to induce greater cell death. However, the assay should be repeated in
order to check the reproducibility of the results.
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