Caracterización, a través de técnicas de imagen, del uso de Caenorhabditis Elegans como indicador del daño oxidativo

Abstract

[ES] El objetivo de este trabajo fue evaluar, a través de técnicas de imagen como son la locomoción y la fluorescencia, el uso de Caenorhabditis Elegans como indicador del daño oxidativo generado por el agente oxidante peróxido de hidrógeno. Para ello, una vez sincronizados adultos de C. elegans, fueron expuestos a cinco concentraciones de H2O2 (0, 1, 2, 5 y 7 mM) durante un tiempo de 1, 2 y 5 horas. El efecto del H2O2 fue evaluado a través de la cuantificación de la locomoción (cantidad de movimiento total) y de la fluorescencia de los tejidos dañados, así como por el conteo de los individuos fallecidos (análisis de letalidad). Los resultados mostraron un efecto de la dosis de H2O2 y del tiempo de exposición sobre el comportamiento del C. elegans. Así, el incremento de ambos produjo un incremento en la letalidad del nemátodo y una disminución en la cantidad de movimiento total de éstos la cual se pudo relacionar directamente con la mortalidad. El análisis de la fluorescencia también evidenció el efecto de dosis y tiempo de exposición a H2O2 sobre los nemátodos, incrementando la cantidad de ésta con el incremento de la intensidad del tratamiento. Este incremento de la fluorescencia evidenció el efecto que agentes como el H2O2 tienen sobre los tejidos de C. elegans, la cual fue también relacionada directamente con la letalidad e inversamente con la cantidad de movimiento total. Así pues, mediante la aplicación de las técnicas de imagen de locomoción y fluorescencia se evidenció el uso de Caenorhabditis Elegans como indicador del daño oxidativo generado por el agente oxidante peróxido de hidrógeno.

[EN] The objective of this proyect was evaluating, through imaging techniques such as locomotion and fluorescence, the use of Caenorhabditis Elegans as an indicator of oxidative damage generated as a result of the oxidant agent hydrogen peroxide. In order to achieve it, once synchronized adult strains of C. elegans, these strains were exposed to five different concentrations of H2O2 (0, 1, 2, 5 y 7 mM) for a period of 1, 2 and 5 hours. The effect of H2O2 was evaluated though locomotion quantification (total movement amount) and the fluorescence of damaged tissues, in addition of the count of the dead individuals (lethality analysis). The results showed an effect in the lethality of the nematode and a decrease in the total amount of movement of these ones, which was linked to their mortality. The analysis of the fluorescence evidenced the effect of dose and exposure time to H2O2 over nematodes as well, increasing the amount of this with the rise of the intensity of the treatment. This increase of the fluorescence also showed the effect that agents as hydrogen peroxide have over the C. elegans tissues, which was directly linked to the lethality and inversely with the total movement amount. In conclusion, by application of imaging techniques of locomotion and fluorescence it was evidenced the use of C. elegans as indicator of oxidative damage generated by the oxidant agent hydrogen peroxide.