Ensayos de hibridación de ADN en formato microarray para la detección de E. coli: Estudio de funcionalizaciones superficiales que mejoren las prestaciones de sensibilidad y especificidad

Abstract

[ EN ] The present work arises from the current need to develop new diagnosis strategies in the medical sector which allow for a fast and precise detection of diverse infectious pathologies. Furthermore, it looks to develop the capability of designing sensitive, of simple handling, multiplexable, small and inexpensive tools. A detection system capable of combining these characteristics would greatly ease clinical diagnosis. The detection systems in microarray format offer the possibility of integrating these qualities, thus making them suitable for the development of diagnosis platforms. Nevertheless, in order to implement this technique, grafting the molecule which will act as a receptor on an adequate surface becomes indispensable. This step is essential in the subsequent system’s development and features, and is highly conditioned by the microarray’s surface properties. This work not only presents a comparison of the three different functionalization strategies which modify the microarray’s surface properties, but also the evaluation of the resultant properties in the detection system. The chosen material to develop the microarray is glass, due to its low cost and good optical properties. The present work focuses, concretely, on a diagnosis system based on DNA.

[ ES ] El presente trabajo surge de la necesidad actual de desarrollar nuevas estrategias de diagnóstico en el sector médico que permitan una detección rápida y precisa de diversas patologías infecciosas. Se busca asimismo la capacidad de diseñar herramientas sensibles, de manejo sencillo, multiplexables, de dimensiones reducidas y económicas. Un sistema de detección capaz de aunar estas características facilitaría en gran medida el diagnóstico clínico. Los sistemas de detección en formato microarray ofrecen la posibilidad de integrar estas cualidades, convirtiéndolos en idóneos para desarrollar plataformas de diagnóstico. Sin embargo, para implementar esta técnica resulta indispensable inmovilizar la molécula que actuará como receptor sobre un soporte de una manera adecuada. Este paso resulta esencial en el posterior desarrollo y prestaciones del sistema, y se halla condicionado en gran medida por las propiedades de la superficie del microarray. Este trabajo plantea la comparación de tres diferentes estrategias de funcionalización que modifican las propiedades de la superficie del microarray, así como la evaluación de las propiedades resultantes en el sistema de detección. El material seleccionado para desarrollar el microarray es el vidrio, debido a su bajo coste y buenas propiedades ópticas. El presente trabajo se centra, concretamente, en un sistema de diagnóstico basado en ADN.