Diseño, desarrollo y validación de nuevas herramientas genéticas para el diagnóstico molecular de las enfermedades neurológicas producidas por mutaciones dinámicas

Abstract

[EN] The finding of abnormal expansions of triplets or dynamic mutations was one of the most exciting genetic discoveries in the early 90s, as it represented the knowledge of a mutational mechanism never seen before. Since that time, have been described almost 20 diseases, neurological-most-which are caused by abnormal expansion rate triplet CAG / CTG, CGG / CCG and GAA. For each of these diseases molecular study protocol is different: the majority based on PCR amplification of the fragment or where the triplet by Reaction Polymerase Chain, the "primer" or primers, the fragment amplified, the concentration of reagents and conditions (temperatures and cycles) of the reaction are different but which increases greatly in the laboratory for analysis, being rare diseases. Therefore the aim of the project is to optimize all PCR conditions to simultaneously analyze all dynamic mutations using for it the lowest cost possible personnel and reagents.

[ES] El hallazgo de las expansiones anómalas de tripletes o mutaciones dinámicas constituyó uno de los descubrimientos genéticos más excitantes en los inicios de los años 90, puesto que representaba el conocimiento de un mecanismo mutacional nunca visto hasta entonces. Desde eso momento, han sido descritas hasta casi 20 enfermedades, -la mayoría neurológicas-, que tienen como causa la expansión anómala de tripletes del tipo CAG/CTG; CGG/CCG y GAA. Para cada una de estas enfermedades el protocolo molecular de estudio es diferente: basándose la mayoría en la PCR o amplificación del fragmento en donde se encuentra el triplete por medio de la Reacción en Cadena de la Polimerasa, los cebadores, el fragmento amplificado, la concentración de los reactivos y las condiciones (ciclos y temperaturas) de la reacción son sin embargo diferentes lo que encarece enormemente el análisis en el laboratorio pues, al ser enfermedades raras. Por lo tanto el objetivo del proyecto es la optimización de todas las condiciones de PCR para poder analizar de forma simultánea todas las mutaciones dinámicas empleando para ello el mínimo coste de personal y reactivos posible.