Efecto de la modulación del factor inductible por hipoxia (HIF) sobre la degeneración retiniana en retinosis pigmentaria

Abstract

[EN] Retinitis Pigmentosa (RP) is a common form of hereditary retinal degeneration characterized by loss of retinal photoreceptor cells (rods and cones). It constitutes the largest genetic single cause of blindness in the developed world. The high genetic heterogeneity of RP makes it difficult to understand the pathogenetic mechanism causing photoreceptor death. Mutations are responsible for rod death. However, cone death seems to be produced due to metabolic changes after rod degeneration as hiperoxia or high levels of oxygen, that generates oxidative and nitrosative stress. Cone death leads to loss of central vision in RP. Hyperoxia observed in experimental models of RP could affect hypoxia inducible factor 1α (HIF-1α) and probably its target genes. Some HIF-target genes are altered in animal models of RP and in patients. The objective of this project is to evaluate whether RP changes the amount of HIF-1α and its target genes, and if its stabilization alters the expression of its target genes and the antioxidant status. We will use the human autosomal recessive RP model, rd10 mouse strain. rd10 mouse will be exposed to DMOG (Dimetiloaxil glicine), a prolyl hydroxilase inhibitor. HIF and its target genes will be evaluated by biochemical (Western Blot) and molecular (Quantitative PCR) techniques, in addition to antioxidant status (total antioxidant capacity, superoxide dismutase, TBARS).

[CA] La retinosi pigmentària (RP) és una forma de degeneració retiniana hereditària caracteritzada per la perduda dels fotorreceptors (bastons i cons) de la retina. Constituïx la principal causa genètica de ceguera en els països desenvolupats. Degut a la seua elevada heterogeneïtat genètica és difícil comprendre els mecanismes patogenètics responsables de la mort dels fotorreceptors. Les mutacions genètiques són les responsables de la mort dels bastons. No obstant, la mort dels cons pareix deguda als canvis metabòlics provocats per la degeneració dels bastons com la hiperoxia o aument d’oxígen que, genera estrés oxidatiu i nitrosatiu. La mort d’aquestos cons provoca la perduda de la visió central en la RP. La hiperoxia observada en els models experimentals de RP afectaria als nivells del factor inducible per hipoxia 1α (HIF-1α) i probablement de les seues dianes. Alguns dels gens regulats per HIF estàn alterats en els models animals de RP i en pacients. L’objectiu d’aquest projete és evaluar si la RP altera el contingut de HIF-1α i les seues dianes i l’estat antioxidant. Per a això s’emprarà el model de RP autosòmica recessiva, ratolí rd10. Els ratolins rd10 seràn tratats amb DMOG (dimetiloxalil glicina), un inhibidor de prolil-hidroxilases. S’evaluarà el contingut de HIF i les seues dianes mitjançant tècniques bioquímiques (Western Blot) i de biologia molecular (PCR quantitativa), així com l’estat antioxidant (Capacitat antioxidant total, superòxid dismutasa, TBARS).

[ES] La retinosis pigmentaria (RP) es una forma de degeneración retiniana hereditaria caracterizada por la pérdida de los fotorreceptores (bastones y conos) de la retina. Constituye la principal causa genética de ceguera en los países desarrollados. Debido a su elevada heterogeneidad genética es difícil comprender los mecanismos patogenéticos responsables de la muerte de los fotorreceptores. Las mutaciones genéticas son las responsables de la muerte de los bastones. Sin embargo, la muerte de los conos parece debida a los cambios metabólicos provocados por la degeneración de los bastones como la hiperoxia o aumento de oxígeno que, genera estrés oxidativo y nitrosativo. La muerte de estos conos provoca la pérdida de la visión central en la RP. La hiperoxia observada en los modelos experimentales de RP afectaría a los niveles del factor inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) y probablemente al de sus dianas. Algunos de los genes regulados por HIF están alterados en los modelos animales de RP y en pacientes. El objetivo de este proyecto es evaluar si la RP altera el contenido de HIF-1α y sus dianas y si su estabilización altera la expresión de sus dianas y el estado antioxidante. Para ello se empleará el modelo de RP autosómica recesiva, ratón rd10. Los ratones rd10 se tratarán con DMOG (dimetiloxalil glicina), un inhibidor de prolil-hidroxilasas. Se evaluará el contenido de HIF y sus dianas mediante técnicas bioquímicas (Western Blot) y de biología molecular (PCR cuantitativa), así como el estado antioxidante (capacidad antioxidante total, superóxido dismutasa, TBARS).