- -

Aplicación de Mutagénesis por Transposición y Secuenciación Masiva para el Estudio Funcional de Genes Codificados por Enterococcus faecium

RiuNet: Institutional repository of the Polithecnic University of Valencia

Share/Send to

Cited by

Statistics

Aplicación de Mutagénesis por Transposición y Secuenciación Masiva para el Estudio Funcional de Genes Codificados por Enterococcus faecium

Show simple item record

Files in this item

dc.contributor.advisor Jiménez Belenguer, Ana Isabel es_ES
dc.contributor.advisor Ubeda Morant, Carles es_ES
dc.contributor.author García Bonillo, Cristina es_ES
dc.date.accessioned 2015-09-04T16:22:58Z
dc.date.available 2015-09-04T16:22:58Z
dc.date.created 2015-07-17
dc.date.issued 2015-09-04 es_ES
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10251/54313
dc.description.abstract [ES] Se transformará una cepa multirresistente de E. faecium con un plásmido (pZXL5) que contiene un transoposón que codifica para resistencia a gentamicina y se inserta aleatoriamente en el genoma de la bacteria. las bacterias que hayan insertado el transposón en el genoma bacteriano. Se crecerán 20 de las colonias identificadas, se extraerá su DNA y mediante Shouthern Blot se comprobará que la inserción ha sido aleatoria y que únicamente una copia del transposón se ha insertado en el cromosoma. Seguidamente se utilizará la secuenciación masiva para detectar el lugar de inserción del transposón en el cromosoma con una mezcla bacteriana que contenga aproximadamente 108 mutantes. Posteriormente serán infectados ratones. Dos días tras la infección se tomarán muestras del intestino, se extraerá su DNA y se analizarán los sitios de inserción del transposón en el cromosoma. A partir de estos datos definirán aquellos genes que pudieran ser importantes para la colonización intestinal de Enterococo es_ES
dc.description.abstract [EN] The aim of this work is to elaborate an appropriate methodology to identify genes encoded by multidrug-resistant strains of Enteroccus faecium which are necessary for colonization of the intestinal tract. In order to do so, a mutagenesis system by transposition and massive sequencing will be used. The strain E1162 Enterococcus faecium will be transformed with the pZXL5 plasmid which contains a gentamicin resistant coding transposon that will be randomly inserted into the bacterial genome. The pZXL5 plasmid is temperature sensitive making it unable to replicate at temperatures above 30ºC. The strain transformed with the plasmid will be grown in medium with gentamicin at a temperature above 30ºC, obtaining only those bacteria where the transposon was randomly inserted in the genome. Finally, by massive sequencing technique, the transposon insertion site in the chromosome will be identified and the relative abundance of mutants will be measured. es_ES
dc.language Español es_ES
dc.publisher Universitat Politècnica de València es_ES
dc.rights Reconocimiento - No comercial - Sin obra derivada (by-nc-nd) es_ES
dc.subject Colonización del tracto intestinal es_ES
dc.subject Enterococcus faecium es_ES
dc.subject Mutagénesis es_ES
dc.subject Secuenciación masiva. es_ES
dc.subject Mutagenesis es_ES
dc.subject Massive sequencing es_ES
dc.subject Intestinal tract colonization es_ES
dc.subject.classification MICROBIOLOGIA es_ES
dc.subject.other Grado en Biotecnología-Grau en Biotecnologia es_ES
dc.title Aplicación de Mutagénesis por Transposición y Secuenciación Masiva para el Estudio Funcional de Genes Codificados por Enterococcus faecium es_ES
dc.type Proyecto/Trabajo fin de carrera/grado es_ES
dc.rights.accessRights Abierto es_ES
dc.contributor.affiliation Universitat Politècnica de València. Escuela Técnica Superior de Ingeniería Agronómica y del Medio Natural - Escola Tècnica Superior d'Enginyeria Agronòmica i del Medi Natural es_ES
dc.contributor.affiliation Universitat Politècnica de València. Departamento de Biotecnología - Departament de Biotecnologia es_ES
dc.description.bibliographicCitation García Bonillo, C. (2015). Aplicación de Mutagénesis por Transposición y Secuenciación Masiva para el Estudio Funcional de Genes Codificados por Enterococcus faecium. http://hdl.handle.net/10251/54313. es_ES
dc.description.accrualMethod TFGM es_ES
dc.relation.pasarela TFGM\22602 es_ES


This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record