Aumento de dosis génica de los genes DPL1, SSD1 y SRP101 en Saccharomyces cerevisiae y fenotipo de tolerancia a acidificación intracelular

Abstract

[ES] El pH alto intracelular es una señal promotora del crecimiento y proliferación de las células pero sus mecanismos no son bien conocidos. En un trabajo previo se había identificado una región genómica de levadura que al ser transformada en plásmido de copia simple aumenta el crecimiento de la levadura en condiciones de acidificación intracelular. Esta región contiene tres genes, DPL1, SSD1 y SRP101 y en este trabajo hemos identificado el gen SSD1 como el responsable del fenotipo de pH. Este gen codifica un regulador del crecimiento de la levadura que coopera con otros reguladores importantes como la proteína kinasa TORC1 y la proteína fosfatasa Sit4. El mecanismo de Ssd1 se basa en unir y estabilizar RNA mensajeros de ciclinas y el alelo clonado es la forma activa del gen presente en levaduras silvestres, mientras que las cepas de laboratorio poseen una forma truncada inactiva. Ssd1 también mejora el crecimiento en condiciones normales, sin estrés ácido, en medio con amonio pero no en medio con aminoácidos como fuente de nitrógeno. Como los aminoácidos y el pH alto activan TORC1, podemos sugerir que Ssd1 aumenta la expresión de ciclinas cuando TORC1 no está completamente activado por pH alto o por aminoácidos.

[EN] Intracellular pH is a signal promoting cell growth and proliferation by poorly known mechanisms. In previous work, a yeast genomic region was identified that by transformation in single copy plasmid improves yeast growth under conditions of intracellular acidification. This region contains three genes, DPL1, SSD1 and SRP101, and in the present work we have identified SSD1 as the one responsible of the pH phenotype. This gene encodes a regulator of yeast growth that cooperates with other important regulators such as the protein kinase TORC1 and the protein phosphatase Sit4. The mechanism of Ssd1 consists on binding and stabilizing of cyclin mRNAs and the cloned allele is the active form present in wild yeast while laboratory strains express a truncated, inactive form. Ssd1 also improves growth under normal conditions, without pH stress, in media with ammonia but not in media with amino acids as nitrogen source. As amino acids and high pH activate TORC1, it may be suggested that Ssd1 increases cyclin expression when TORC1 is not fully activated by either high pH or amino acids