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Puesta a punto de un método para la determinación de la viabilidad de microalgas en sistemas de tratamiento de aguas residuales

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Puesta a punto de un método para la determinación de la viabilidad de microalgas en sistemas de tratamiento de aguas residuales

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dc.contributor.advisor Pachés Giner, María Aguas Vivas es_ES
dc.contributor.author Roldán Barreda, Sandra es_ES
dc.date.accessioned 2015-11-20T08:45:32Z
dc.date.available 2015-11-20T08:45:32Z
dc.date.created 2015-09-23
dc.date.issued 2015-11-20
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10251/57811
dc.description.abstract [ES] El presente trabajo pretende desarrollar una metodología que permita la detección, visualización y cuantificación de la viabilidad celular en microalgas procedentes de cultivos empleados pare el tratamiento de aguas residuales, mediante el empleo del colorante Sytox Green (Invitrogen, S7020), tinte de ácidos nucleicos. La motivación de este estudio es responder a la necesidad de implementar un procedimiento rápido y eficaz para la determinación de la viabilidad celular a través de microscopía de epifluorescencia, en el campo referente al tratamiento de aguas residuales mediante microalgas. Para la puesta a punto de la técnica se han utilizado muestras provenientes de dos sistemas, uno a escala de planta piloto, formado por 4 fotobioreactores semicontinuos de una planta piloto instalada en la EDAR del Carraixet, de post tratamiento de agua tras un tratamiento anaerobio, y otro de un reactor semicontínuo a escala de laboratorio. Los parámetros a optimizar son el tiempo de incubación de las muestras con Sytox, la concentración de sólidos en las muestras y la concentración de Sytox para que el cálculo de la viabilidad celular se realice correctamente. Después de realizar las pruebas los resultados obtenidos son un tiempo de incubación de 5 minutos, una concentración de sólidos suspendidos totales en las muestras de 250-400 mg/L, una relación volumen de muestra-volumen de Sytox 50:0,1 (50 µL muestra y 0,1 µL Sytox) y una concentración de Sytox entre 5-8 µl Sytox/mg SST o 2000 µl Sytox/L en ese rango de concentración de sólidos (250-400 mg/L). También se ha determinado el error que se produce al realizar el método. Éste puede llegar a ser del 12 %. Se calcula el error sistemático y aleatorio producido por las pipetas y cámara Neubauer y la incertidumbre típica causada por la repetitividad. El método de análisis de viabilidad mediante Sytox ha sido comparado con el método de epifluorescencia sobre membranas de policarbonato, confirmado que no hay diferencias estadísticamente significativas entre los resultados obtenidos tras realizar la viabilidad mediante Sytox y aquellos procedentes del método de epifluorescencia. Finalmente, se ha aplicado la técnica desarrollada en el presente trabajo para analizar la viabilidad en un reactor y compararla con la eliminación de nutrientes en el periodo de estudio comprendido entre el 10/04/2014 y el 14/07/2014. es_ES
dc.description.abstract [CA] El present treball pretén desenvolupat una metodologia que faça possible la detecció, visualització i quantificació de la viabilitat cel·lular en microalgues de cultius que es fan servir per al tractament d’aigües residuals, mitjançant el colorant Sytox Green (Invitrogen, S7020), tinc d’àcids nucleics. L’objectiu d’aquest estudi és dur a terme un procediment ràpid i efectiu per a la determinació de la viabilitat cel·lular amb microscòpia d’epifluorescència en el camp referent al tractament d’aigües emprant l’ús d’algues. Les mostres utilitzades corresponen a dos sistemes, un a escala pilot format per quatre fotobioreactors semicontinuos d’una planta pilot ubicada en la EDAR del Carraixet de post tractament d’aigües després d’un tractament anaerobi i l’altre d’un reactor semicontinuo a escala de laboratori. Els paràmetres a optimitzar són el temps d’incubació de les mostres amb el Sytox, la concentració de sòlids en les mostres i la concentració del Sytox per tal que el càlcul de la viabilitat siga correcte. Els resultats indiquen que 5 minuts d’ incubació i una concentració de sòlids suspesos totals de 250-400 mg/L són els més adients. També una relació, volum de mostra-volum de Sytox de 50:0,1 (50 µL mostra y 0,1 µL Sytox) i una concentració entre 5-8 µl Sytox/mg SST o 2000 µl Sytox/L A més en aquest estudi s’ha determinat l’error propi del mètode. Aquest pot arribar a ser del 12%. S’han calculat els errors sistemàtic i aleatori produït per les pipetes i la incertesa típica causada per la repetitivitat. Els errors sistemàtics es poden reduir mitjançant el calibrat periòdic de les pipetes. Per altra banda, l’ error aleatori és por reduir mitjançant l’ús adient dels materials. Per últim, la incertesa típica es pot minimitzar augmentant el nombre de repeticions realitzades d’ una mateixa mostra. El mètode desenvolupat s’ha comparat amb el mètode de epifluorescència sobre membranes de policarbonat, i s’ha pogut confirmar que no hi han diferències estadísticament significatives entre els resultats, llavors com el mètode del Sytox aporta més informació es recomana l’ ús del mateix. Per últim, s’ha aplicat la tècnica desenvolupada en el present treball per analitzar la viabilitat d’un dels quatre fotobioreactors i relacionar els resultats en l’eliminació de nutrients en el període d’estudi 10/04/2014 -14/07/2014. es_ES
dc.description.abstract [EN] The aim of this study is to develop a methodology that allows the detection, visualization and quantification of cellular viability in microalgae culture using the colouring Sytox Green (Invitrogen, S7020), dye of acids nucleic. This methodology allows implementing a rapid and effective procedure for the determination of the cellular viability using epifluorescence microscopy For the establishment of this methodology samples from two systems have been used; one belongs to a pilot plant, formed by 4 photobioreactors installed in the EDAR of the Carraixet, and the others belong to a laboratory-scale reactor. The parameters optimized in order to calculate cellular viability are the incubation time of the samples with Sytox, the sample solid concentration and Sytox's concentration. The results obtained are; incubation time of 5 minutes, total suspended solid concentration of 250-400 mg/L, volume of Sytox's ‘ volume sample relation of 50:0,1 (50 µL shows and 0,1 µL Sytox) and Sytox's concentration between 5-8 µl Sytox/mg SST or 2000 µl Sytox/. Furthermore the error index has been calculated. This can be up to 12 %. The systematic and random errors have also been analyzed. Moreover, the method has been compared to the cell-counting membrane method by epifluorescene. It has been confirmed that there are no statistically significant differences between them, thus it is recommended the use of cell viability method since it provides more accurate information. es_ES
dc.format.extent 89 es_ES
dc.language Español es_ES
dc.publisher Universitat Politècnica de València es_ES
dc.rights Reserva de todos los derechos es_ES
dc.subject Viabilidad celular en microalgas es_ES
dc.subject Sytox green tiente de ácidos nucleicos es_ES
dc.subject Viabilitat cel·lular en microalgues es_ES
dc.subject Sytox green tinc d'àcids nucleics es_ES
dc.subject Cellular viability in microalgae es_ES
dc.subject Sytox Green nucleic acid stain es_ES
dc.subject.classification TECNOLOGIA DEL MEDIO AMBIENTE es_ES
dc.subject.other Máster Universitario en Ingeniería Ambiental-Màster Universitari en Enginyeria Ambiental es_ES
dc.title Puesta a punto de un método para la determinación de la viabilidad de microalgas en sistemas de tratamiento de aguas residuales es_ES
dc.type Tesis de máster es_ES
dc.rights.accessRights Abierto es_ES
dc.contributor.affiliation Universitat Politècnica de València. Escuela Técnica Superior de Ingenieros de Caminos, Canales y Puertos - Escola Tècnica Superior d'Enginyers de Camins, Canals i Ports es_ES
dc.description.bibliographicCitation Roldán Barreda, S. (2015). Puesta a punto de un método para la determinación de la viabilidad de microalgas en sistemas de tratamiento de aguas residuales. http://hdl.handle.net/10251/57811. es_ES
dc.description.accrualMethod Archivo delegado es_ES


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