Regeneración de calabacín (Cucurbita pepo L.) mediante técnicas de cultivo in vitro

Abstract

[ES] El cultivo in vitro engloba un conjunto de técnicas que permite la multiplicación (micropropagación), el saneamiento (cultivo de meristemos y microinjerto) y la mejora genética (obtención de haploides, aprovechamiento de la variación somaclonal, fusión de protoplastos, transformación genética,…) de prácticamente todas las especies vegetales de interés agronómico. Para llevar a cabo todo este tipo de técnicas es necesario disponer de metodologías que permitan la regeneración de plantas a partir de diferentes tipos de explantes. En nuestro grupo hemos trabajado con especies pertenecientes a la familia de las solanáceas (tomate) y de las cucurbitáceas (melón, pepino y sandía) y queríamos comenzar a trabajar con una especie como calabacín (Cucurbita pepo L.). El presente Trabajo Fin de Grado se ha centrado en establecer una metodología que permita la inducción de organogénesis directa y la regeneración de plantas a partir del cultivo in vitro de explantes primarios de calabacín. Para ello, se ha partido de semillas de tres líneas diferentes. A estas semillas se le ha eliminado la cubierta, se han esterilizado y se han cultivado en medio de germinación para que en pocos días desarrollen plántulas. A partir de estas plántulas se han obtenido los distintos explantes que se han utilizado en el trabajo: cotiledón, hipocótilo y ápice meristemático. Se ha conseguido regenerar brotes a partir de los tres genotipos evaluados en diferentes medios de cultivo. Los brotes regenerados se han individualizado y tras su enraizamiento y aclimatación se han conseguido plantas con un crecimiento normal en condiciones de cultivo in vivo.

[EN] Plant tissue culture includes a set of techniques that virtually allows the multiplication (micropropagation), sanitation (meristem culture and micrografting) and genetic improvement (production of haploid plants, use of somaclonal variation, protoplast fusion, genetic transformation,...) all plant species of agronomic interest. To carry out all these techniques is necessary to have methodologies that allow the plants regeneration from different types of explants. We have worked with species belonging to the family Solanaceae (tomato) and Cucurbitaceae (melon, cucumber and watermelon) and wanted to start working with a species like zucchini (Cucurbita pepo L.). This Project has focused on establishing a methodology for direct induction of organogenesis and plant regeneration from plant tissue culture of zucchini primary explants. For this purpose, we have worked with seeds from three different varieties. The cover of the seeds was removed, then the seeds were sterilized and cultured in germination medium to develop seedlings. From these seedlings we have obtained different explants: cotyledon, hypocotyl and meristem apex. The regenerated shoots from the three genotypes have been individualized. After their rooting and acclimatization plants have been achieved normal growth in the greenhouse.