Estudio de la metilación de los genes FLNc y POLE en cáncer de mama

Abstract

[ES] La epigenética comprende el estudio de modificaciones en la expresión de genes que no obedecen a alteraciones en la secuencia de ADN. Entre estas modificaciones se encuentra la metilación del ADN, que puede alterar anormalmente la expresión de genes en procesos celulares y contribuir al desarrollo y progresión del cáncer de mama. Las células tumorales se caracterizan por una pérdida masiva de metilación y al mismo tiempo por la adquisición de un patrón de hipermetilación en islas CpG de ciertos promotores. En el caso de genes reparadores del ADN, ciertas metilaciones anormales podrían causar un silenciamiento del gen, por lo que se dejaría de realizar correctamente esta función reparadora. Alteraciones en los niveles normales de metilación de estos genes podrían estar implicadas en la etiología del tumor, así como en los mecanismos de resistencia a alguno de los tratamientos actuales. Por otra parte, los genes codificantes de proteínas de adhesión y estructura celular desempeñan un papel fundamental en la progresión y metástasis, debido a que pueden facilitar la interacción de las células tumorales con células de tejidos lejanos. De la misma manera, ciertas modificaciones en estos genes podrían relacionarse con diferencias en la capacidad de los tumores de producir una metástasis. En este proyecto se ha estudiado la metilación de regiones concretas de POLE, un gen reparador del ADN; y FLNc, gen relacionado con la estructura y adhesión celular, mediante la tecnología Sequenom. Se han utilizado líneas celulares de diferentes subtipos de cáncer de mama (HER2+, luminales y triple negativo) y las líneas no tumorales de mama MCF10A y MCF12A, con el objetivo de encontrar un posible patrón de metilación relacionado con la existencia de la enfermedad y su desarrollo y por lo tanto, un posible marcador de diagnóstico y/o pronóstico. Esto es de especial importancia en el subtipo triple negativo, el cual actualmente carece de un tratamiento anti- diana específico efectivo.

[EN] Epigenetics comprise the study of gene expression modifications different from DNA sequence alterations. One of this modifications is DNA methylation, which may alter gene expression in cellular processes and contribute to breast cancer development and progression. Tumour cells are characterized by a massive loss of methylation and also a hypermethylated pattern in certain promoters. In DNA repair genes, certain abnormal methylations may cause gene silencing, and therefore damaged DNA would not be repaired. Alterations in methylation levels may be involved in tumour etiology and also in some resistance mechanisms of current treatments. Structural and cell adhesion proteins coding genes have a pivotal role in metastasis and progression, since it is facilitated by the interaction between tumor cells and distant tissue cells. In the same way as before, certain modifications in these genes may be related with differences in levels of metastization. In this project, methylation of certain regions of a DNA repair gene (FLNc) and a gene involved in the cell structure and adhesion (POLE) have been studied by means of Sequenom technology. Cell lines from different breast cancer subtypes (HER2+, luminal and triple negative) and the non-tumoral cell lines MCF10A and MCF12A have been used in order to find a methylation pattern related with the presence and development of breast cancer, and therefore a possible diagnostic or prognosis marker. This is particularly important in triple negative cancer, which lacks of an effective specific anti-target treatment.