Diversidad de pitiáceos asociados a la rizosfera de plantas de diferentes especies

Abstract

[ES] La presente investigación se realizó en el Laboratorio de Patología Vegetal de la Escuela Técnica Superior de Ingeniería Agronómica y del Medio Natural en la Universitat Politècnica de Valencia. Se conoce bien que diversas especies de Pythium causan ‘damping off’ durante las primeras semanas de vida de las plantas. Sin embargo, la información acerca de la interacción de Pythium spp. con las raíces de árboles es escasa. El objetivo de este trabajo fue identificar aislados del género Pythium asociados a la rizosfera de árboles con síntomas de decaimiento, pertenecientes a distintas especies. También se determinó su tasa de crecimiento a distintas temperaturas. La identificación molecular se basó en las secuencias de la región ITS (Internal Transcribed Spacer) del ADN ribosomal y la subunidad II de la citocromo c oxidasa (COXII) del ADN mitocondrial. Estas secuencias se amplificaron mediante la técnica PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) usando parejas de cebadores universales. Los resultados identificaron 14 especies de Pythium en la colección de aislados analizada. Para la caracterización morfológica, se indujo la formación de estructuras de reproducción, incubando discos de cultivos de Pythium en agua destilada y hojas de Lolium perenne. En aquellos casos en que la identificación molecular del aislado no fue definitiva, la observación al microscopio óptico de sus estructuras de reproducción permitió reconocer su especie. Para determinar la tasa de crecimiento de Pythium spp. y las temperaturas mínima y máxima de cada especie, se cultivó una selección de aislados en medio V8 a distintas temperaturas (5 , 10, 15, 20, 25, 30, 35 y 40 °C), realizando dos repeticiones con tres unidades experimentales cada una.

[EN] The present research was carried out in the Laboratory of Plant Pathology at the Universitàt Politécnica de Valencia. Several species of Pythium are known to cause damping off during the first weeks of plant life. However, information about the interaction of Pythium spp. with the roots of trees is scarce. The objective of this work was to identify isolates of the genus Pythium associated to the rhizosphere of trees with symptoms of decay, belonging to different species. Their growth rate was also determined at different temperatures. Molecular identification was based on the ITS (Internal Transcribed Spacer) region of ribosomal DNA and the cytochrome c oxidase (COX II) subunit II of mitochondrial DNA. These sequences were amplified by the PCR (Polymerase Chain Reaction) technique using pairs of universal primers. The results identified 14 species ok Pythium in the collection of isolates analyzed. The formation of reproduction structures was induced for the morphological characterization, incubating plugs of Pythium cultures in distilled water and leaves of Lolium perenne. In those cases, in which the molecular identification of the isolate was not definitive, the observation under the optical microscope of its reproduction structures allowed to recognize the species. To determine the growth rate of Pythium spp. and minimum and maximum temperatures of each species, a selection of isolates werw grown on V8 medium at different temperatures (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 an 40 °C), perfoming two replicates with three experimental units each one.