Efecto de la presencia de antioxidantes en el diluyente de refrigeración sobre la calidad seminal y la oxidación lipídica del plasma seminal en conejo

Abstract

Storage of rabbit semen for longer than 36 h causes deterioration of semen quality. Therefore, the aim of this study was to evaluate the addition of antioxidants, membrane protective and/or aminopeptidase activity substances to an EDTA supplemented extender on rabbit semen quality preserved at 16ºC during 72 h. Experiment one was carried out to evaluate the effect of the inclusion of two water soluble analogs of vitamin E (Trolox and ¿-tocopherol) and / or dextran on spermatozoa motility, viability, acrosome status and membrane functionality. In a second experiment the inclusion of bestatin in the extenders with Trolox and / or dextran on seminal quality and lipid oxidation was evaluated. The presence of ¿-tocopherol in the extender significantly decreased all seminal quality parameters over time, whereas the presence of Trolox and dextran did not affect them. In the second experiment, no significant differences among the experimental extenders were observed either for the seminal quality parameters or for the lipid oxidation of the seminal plasma at 72 hours of refrigeration. The cooling time significantly affected the viability and integrity of the acrosome (P <0.05), however, no significant differences were observed in the kinetic parameters, membrane functionality and lipid oxidation of the seminal plasma, showing at 72 and 0 hours similar values. The inclusion of bestatin in all extenders had a positive effect on semen conservation, maintaining the semen characteristics and lipid oxidation over time, regardless of whether the extender was supplemented or not with dextran or Trolox. In conclusion, the combination of EDTA and bestatin proved to be a suitable alternative in the refrigerated semen extender since it avoids the antioxidant activity and maintains membrane motility and functionality over the cooling period studied.

El semen de conejo puede ser conservado en refrigeración un corto periodo de tiempo antes de que se reduzca o pierda su capacidad fecundante, por lo que no suele utilizarse en inseminación artificial más allá de 36 horas desde su extracción. Por ello el objetivo del presente estudio fue estudiar el efecto de la suplementación de sustancias con actividad protectora de membrana, antioxidante y antiproteasa a un diluyente con EDTA sobre la calidad espermática y la oxidación lipídica del plasma seminal del semen refrigerado a 16ºC durante 72 horas. En un primer experimento se evaluó el efecto de la inclusión de dos análogos hidrosolubles de la vitamina E (Trolox y ¿-tocoferol) y/o el dextrano sobre los parámetros de calidad seminal: motilidad, viabilidad, estado del acrosoma y funcionalidad de la membrana. En un segundo experimento se evaluó la inclusión de la bestatina en los diluyentes con Trolox y/o dextrano sobre la calidad seminal y la oxidación de lípidos. La inclusión de ¿-tocoferol en el diluyente disminuyó significativamente los valores de todos los parámetros de calidad seminal a lo largo del tiempo, mientras que la presencia de Trolox y dextrano no afectó a las mismas. En el segundo experimento el diluyente utilizado no afectó significativamente (P>0,05) a los parámetros de calidad seminal ni a la oxidación lipídica del plasma seminal a las 72 horas de refrigeración. El tiempo de refrigeración afectó significativamente a la viabilidad y a la integridad del acrosoma (P<0,05), sin embargo no se observaron diferencias significativas en los parámetros cinéticos, de funcionalidad de membrana y de oxidación lipídica del plasma seminal, manteniéndose los valores de 72 horas similares a los de 0 horas. La inclusión de bestatina en todos los diluyentes tuvo un efecto positivo en la conservación del semen, manteniéndose a lo largo del tiempo las características seminales y el grado de lipoperoxidación, independientemente de que el diluyente estuviera suplementado o no con dextrano o Trolox. En conclusión, la combinación del diluyente con EDTA y bestatina demostró ser una alternativa adecuada en los medios de semen refrigerado ya que evita la actividad antioxidante, mantiene la motilidad y funcionalidad de membrana durante 72 horas de refrigeración.