Genes y polimorfísmos asociados a la osteoporosis

Abstract

[ES] La osteoporosis es una enfermedad que afecta a la mineralización de los huesos y tiene mayor prevalencia en mujeres mayores de 75 años. El uso de biomarcadores en edades tempranas permitiría un mejor tratamiento y prevención de esta enfermedad. Se ha visto que hay una serie de genes, entre ellos RUNX2, CD40 y CD79, asociados al fenotipo óseo que causa la osteoporosis. En este proyecto se pretende comprobar que determinados polimorfismos existentes en estos genes estén asociados a fenotipos óseos, principalmente a densidad mineral ósea (DMO). Una vez detectada la asociación genética, el objetivo es intentar establecer el efecto funcional de la variante genética identificada mediante varias aproximaciones. Una de ellas es la de analizar si afecta a la tasa de transcripción in vitro de genes reporteros. Para ello se clonaría las formas alélicas de 2-3 polimorfismos pertenecientes a varios genes previamente asociados a fenotipos óseos en vectores de tipo luciferasa (pGL3) y determinar la tasa de transcripción in vitro. En el caso del gen CD40, se pretende estudiar si la metilación en una región del promotor rica en GCs afecta también a la tasa de transcripción in vitro de genes reporteros. Para ello se clonaría esta secuencia metilada y sin metilar en vectores libres de GCs (pCpGl). De confirmarse la asociación de estos polimorfismos al fenotipo óseo de la osteoporosis, podría utilizarse como una posible diana terapéutica o como biomarcador.

[EN] Osteoporosis is a disease that affects bone mineralization and is more prevalent in women over 50 years. The use of biomarkers in early ages would allow better treatment and prevention of this disease. It has been found a genetic variants (alleles) in a number of genes, including RUNX2, CD40 and CD79, with bone phenotype associated, among them the osteoporosis. In this project of the degree thesis (TFG) has been pretended to study the possible functionality of some of this variants. Once detected the genetic association, the aim is to try to establish the functional effect of the gene variant identified by several approaches. One is to analyse if it affects the rate of in vivo transcription of reporter genes differentially. To do this, allelic variants of polymorphisms belonging to RUNX2 and CD79A genes, with phenotypes previously associated with bone, have been cloned on a type pGL3 vector and it has been determined the rate of in vitro transcription. For the CD40 gene, it is pretend to study whether methylation at a promoter region rich CGs also affects the rate of in vivo transcription of reporter genes. To do this, methylated and unmethylated sequence of the promoter, have been cloned on a free vector CGs (pCpGL).The results showed differential activity between de RUNX2 and CD79 alleles. In addition, it has been observed that CD40 methylation affects to the gene transcription in the different cellular kinds.