Análisis de la expresión mediante ensayos GUS y caracterización de mutantes del gen SBT4.13 de Arabidopsis thaliana

Abstract

[EN] By screening collections of mutants with transcriptional activation, an Arabidopsis mutant tolerant to intracellular acid stress during germination was identified. After the mapping of the insertion site and expression analysis of the genes nearby the T-DNA, SBT4.13 could be identified as the putative gene responsible for such tolerance. In the phenotype recapitulation with transgenic overexpressing Arabidopsis plants, 4.13 subtilisin was confirmed to be responsible for intracellular stress tolerance during germination in culture medium supplemented with acetic acid. The task to be performed during the TFG would be to study loss of function mutants of this gene in both insertion and overexpression mutants of an antisense version or artificial microRNA. A study of gene expression will also be performed by obtaining plants expressing a fusion of GUS and GFP reporter genes driven by the promoter activity of the gene SBT4.13.

[ES] Mediante experimentos de rastreos de mutantes en colecciones de activación transcripcional se identificó un mutante de arabidopsis que era tolerante a estrés ácido intracelular durante la germinación. Tras la identificación de la zona de inserción y los análisis de expresión de los genes cercanos al T-DNA, se pudo identificar el gen SBT4.13 como el posible responsable de dicha tolerancia. En la recapitulación del fenotipo mediante la obtención de plantas transgénicas de Arabidopsis sobreexpresoras, se pudo confirmar que la subtilisina 4.13 era la responsable de la tolerancia durante la germinación en el medio de cultivo suplementado con ácido acético. La tarea a realizar durante el Trabajo Final de Grado sería el estudio de mutantes de pérdida de función de este gen, tanto en mutantes de inserción, como en mutantes de sobreexpresión de una versión antisentido o un microRNA artificial. También se realizará un estudio de expresión del gen mediante la obtención de plantas que expresen una fusión de los genes reporteros GUS y GFP dirigidos por la actividad del promotor del gen SBT4.13.