Trasplante de células madre derivadas de médula ósea (BMDSC) para promover desarrollo folicular en tejido ovárico previamente dañado por quimioterapia

Abstract

[ES] El envejecimiento, la baja respuesta ovárica y otras condiciones de daño adquirido como los tratamientos oncológicos alteran la función ovárica. Sin embargo, incluso cuando los ovarios dañados pierden su capacidad de ovulación, puede quedar una reserva residual de folículos quiescentes que podrían ser rescatados y desarrollarse, en un nicho ovárico adecuado, dando lugar a ovocitos maduros. La infusión de células madre derivadas de médula ósea (BMDSC) podría proporcionar un ambiente ovárico óptimo para mantener y promover el crecimiento folicular. Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo consistió en evaluar los efectos regenerativos de la infusión de BMDSC humanas en los ovarios de ratones dañados por quimioterapia. Para alcanzar dicho objetivo, hembras de la cepa NOD-SCID se trataron con una dosis reducida y otra estándar de quimioterapia (Busulfan y Ciclofosfamida) con el fin de dañar su función ovárica y simular situaciones de Bajas Respondedoras (PR) e Insuficiencia Ovárica Prematura (POI), respectivamente. Después, se les inyectó PBS (grupo control) o BMDSC obtenidas mediante aféresis de pacientes PR tras su movilización con G-CSF. A lo largo del experimento se evaluó el ciclo estral y peso de las ratonas. Además, los animales fueron estimulados con gonadotropinas y una parte se cruzaron con machos fértiles para evaluar la descendencia o sacrificarlos y recuperar ovocitos/embriones, mientras que el resto fueron sacrificados para recuperar los ovarios y evaluar el estado del nicho ovárico (vascularización, proliferación y apoptosis). Una vez realizado el estudio, se observó que la infusión de BMDSC promovió el crecimiento folicular a los estadios antral y preovulatorio en los ovarios de los ratones que imitaban situaciones de PR y POI. Después de la estimulación ovárica, el número de ovocitos MII, el de embriones de 2-células y el tamaño de las camadas también aumentaron con la inyección de BMDSC. Por último, al examinar el estroma ovárico, se detectó que las BMDSC mejoraban la densidad de microvasos y la proliferación celular, y reducían la apoptosis en ambas condiciones estudiadas. Por lo tanto, la infusión de BMDSC podría considerarse una alternativa para mejorar el desarrollo folicular en pacientes con una función ovárica alterada y una baja reserva folicular.

[EN] Aging, poor ovarian response and other damaging-acquired conditions like oncologic treatments, lead to an impaired ovarian function. Nevertheless, even when damaged ovaries lose their ability to ovulate, they might contain a residual pool of quiescent follicles that could be rescued and developed, in a suitable ovarian niche, giving rise to mature oocytes. Infusion of bone marrow-derived stem cells (BMDSC) could provide an adequate ovarian environment to maintain and promote follicular growth. Therefore, the aim of the present study consisted in assessing regenerative effects of human BMDSC on chemotherapy-damaged ovaries in mice. In order to reach this objective, females of the NOD-SCID strain were treated with a reduced or a standard chemotherapy dosage (Busulfan and Cyclophosphamide) to damage the ovarian function and mimic situations of Poor Responder (PR) and Premature Ovarian Insufficiency (POI), respectively. Then, animals of each dose were injected (via tail vein) with PBS (Control groups) or BMDSC obtained by aphaeresis from Poor Responder women after G-CSF mobilization. Estrous cycle and body weight were monitored daily. Furthermore, animals were stimulated with gonadotropins and one part was mating with fertile males to evaluate offspring or to sacrifice and recover oocytes/embryos, while the rest were sacrificed to recover the ovaries and evaluate the status of the ovarian niche (vascularization, proliferation and apoptosis). After the study, it was observed that infusion of BMDSC promoted follicular growth to the antral and pre-ovulatory stages in mice ovaries mimicking PR and POI. After ovarian stimulation, the number of MII-oocytes and 2-cell embryos and the size of the litters was also increased. Finally, when ovarian stroma was examined, an improvement in micro-vessel density and cell proliferation, together with a decrease in apoptosis were detected after BMDSC in both conditions studied. Therefore, BMDSC infusion could be considered an alternative to improve follicular development in patients with an impaired ovarian function.