Análisis de una nueva mutación G175A en el dominio motor de la kinesina Kif1a implicada en patologías neuronales

Abstract

[ES] La kinesina Kif1a es un transportador intercelular específico de las células neuronales perteneciente a la familia de las N-kinesinas. Hasta la fecha se han descrito numerosas mutaciones en su dominio motor responsables de diversas patologías, como deterioro cognitivo, paraparesia espástica, neuropatía axonal, atrofia cerebelar o déficit intelectual. Recientemente se ha encontrado una nueva mutación (p.G175A) en un paciente con síntomas similares. En el presente trabajo se ha analizado dicha mutación para establecer su efecto sobre la funcionalidad de la proteína. Para ello se ha optimizado un ensayo en la línea celular PC12 para observar la actividad de transporte tanto de la proteína funcional como de la mutada, fusionando el dominio motor de Kif1a a la proteína GFP, pudiéndose incluir la mutación mediante PCR. Por otra parte, se plantea que, a nivel estructural, el efecto que supone el cambio aminoacídico en la proteína puede afectar a su conformación y unión a los micro túbulos, influyendo así en su motilidad.

[EN] Kif1a kinesin is a specific intercellular transporter for neuronal cells belonging to Nkinesins’ family. To date, several mutations in its motor domain have been described as responsible of various pathologies, such as cognitive impairment, spastic paraparesis, axonal neuropathy, cerebellar atrophy or intellectual deficit. Recently a new mutation (p.G175A) its been found in a patient with similar symptoms. In this project, this mutation has been analyzed to establish its effect on protein’s functionality. For this purpose, an assay with the cell line PC12 has been optimized to observe the transport activity of both, the functional and the mutated protein, by fusing the Kif1a motor domain to the GFP protein, allowing to include the mutation by PCR. On the other hand, it is suggested that, atstructural level, the effect of the amino acid change on the protein may affect its conformation and binding to the microtubules, thus affecting its motility.