Ensayo de mutación inversa bacteriana

Abstract

La prueba de mutación inversa bacteriana o test de Ames es el método más utilizado para evaluar el potencial mutagénico de todo tipo de sustancias químicas. Se trata de un ensayo in vitro rápido, barato y fácil de realizar, basado en la capacidad que presentan diferentes cepas bacterianas para revertir mutaciones en presencia de agentes mutágenos. En concreto, en este ensayo se utilizan cepas de Salmonella typhimurium y Escherichia coli que contienen mutaciones en varios genes del operón de la histidina (his-) y del tritófano (trp-), respectivamente. Estas mutaciones impiden que las bacterias puedan sintetizar estos aminoácidos esenciales y que puedan crecer si estos no se encuentran presentes en el medio de cultivo. Solo aquellas bacterias que sufran una mutación puntual que les permita restaurar la capacidad de sintetizar estos aminoácidos, podrán formar colonias en medios con bajas concentraciones de histidina (S. typhimurium) o triptófano (E. coli) y ser contadas. La cantidad de colonias observadas en las placas de cultivo será proporcional al potencial mutagénico de la sustancia en estudio.